文档介绍：微生物实验报告
题目:霉菌的形态观察
姓名:余振洋学号:200900140156 系年级:09生科3班组别:周三4组
同组者:张刚刚、岳永胜、俞华军、谢英健时间:2010年11月10日
一、【实验目的】
1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法
2、了解四类常见霉菌(曲霉、毛霉、青霉、根霉)的基本形态特征
二、【实验原理】
1、霉菌
霉菌可产生复什分枝的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约 3~10μm ),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。
2、观察方法
观察霉菌的形态有多种方法,常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法,本次实验采用载玻片培养观察法(小室培养法)。
3、载玻片培养观察法(小室培养法)
用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。
三、【实验器材】
1、菌种:曲霉( Aspergillus sp. ) ,青霉,根霉( Rhizopus sp. ) ,毛霉( Mucor sp. ),培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物
2、培养基:马铃薯培养基(简称PDA)(配方见附表)
3、仪器或其他用具:平皿,载玻片,盖玻片,无菌吸管,U 型玻棒,解剖刀,镊子,50%乙醇,20%甘油,显微镜,接种环,酒精灯等
四、【操作步骤】
1、载玻片培养观察法(小室培养法)
(1)、培养小室的灭菌:在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片,再放一U形玻棒,其上放一洁净载玻片和两块盖玻片,盖上皿盖,包扎后于110℃灭菌20~30分钟,烘干备用。
(2)、琼脂薄片的制作:取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各6~7ml 注入另两个灭菌平皿中,使之凝固成薄层。通过无菌操作,用解剖刀将其切成 1cmx1cm的琼脂块,并将其移至上述培养室中的载玻片上(每片放两块)。
(3)、接种:通过无菌操作,用接种环从斜面培养物上挑取很少量的孢子,接种于培养小室中琼脂块的边缘上,用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。
(3)、培养: 通过无菌操作,在培养小室中的圆滤纸上加 2~3ml 灭菌的20 %的甘油(用于保持平皿内的湿度) ,盖上皿盖,27 ℃正置培养一周。
(4)、镜检:根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察,必要时换高倍镜。
五、【注意事项】
1、载玻片培养观察中,注意无菌操作,接种量要少,同时尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上,否则培养后菌丝过于稠密影响观察。
六、【实验结果及绘图】
菌种
曲霉
根霉
毛霉
青霉
形态特征
营养菌丝具有分隔;气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成串的球形分生孢子。分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连。
菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根。在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗,其顶