文档介绍：复旦大学
博士学位论文
Ezrin在肝细胞肝癌中的表达及其在门静脉癌栓形成和肿瘤粘附
侵袭中的作用
姓名:孙绮蛮
申请学位级别:博士
专业:外科学
指导教师:樊嘉
20040430
谌烁蜗赴伟┲械谋泶及其在门静脉癌栓形成和肿瘤粘附侵袭中的作用中文摘要背景和目的研究其机制对于改善肝癌患者的总体预后有重要作用。肝癌的侵袭转移以及门液细胞的异型粘附均增强,促进肿瘤微癌栓的形成。而相对于单个细胞,肿瘤前列腺癌、肺癌等中,弑泶铮褽在肿瘤侵袭前缘表达增强,转鼠骨肉瘤转移相关基因时发现,高转移的细胞株泶锪渴堑妥R频更易于侵犯软组织、系膜和胰腺表现更高的侵袭特性。同时,抑制幕肝癌的侵袭转移以及门静脉癌栓的形成是影响患者预后的重要因素,深入静脉癌栓的形成是一个多步骤、多环节共同参与的过程,包括原发瘤脱落、进入血管的肿瘤细胞聚集成微瘤栓以及与内皮细胞粘附着床并形成转移灶。进入血管内的肿瘤细胞其肿瘤细胞间的同型粘附和肿瘤细胞与血管内皮细胞以及血微癌栓更易于在循环系统中存活并着床,更加利于肿瘤侵袭转移和门静脉癌栓的形成。因此,研究肿瘤细胞粘附的相关机制对于了解肿瘤侵袭转移和门静脉癌栓形成是十分必要的。在细胞的粘附侵袭过程中,粘附分子介导的跨膜信号传导引起细胞骨架的重排,从而调节细胞膜表面分子的分布,并形成更加稳固的粘着结构。抑制细胞骨架的重排能够阻断细胞表面分子分布的改变,从而抑制细胞的运动、粘附和侵袭能力。因此,有必要深入研究肿瘤细胞粘附过程中粘附分子和细胞骨架的相应改变。且恢职谙赴羌芰拥鞍祝芯勘砻鳎诙嘀种琢鋈缫认侔移灶泶锩飨愿哂谠⒃睿砻髌浔泶锼接胫琢銮窒喙亍T谙赴方面的研究也得出了相应的结论,等运用际跫觳倍。同样,高侵袭的胰腺癌细胞系、卵巢上皮癌细胞系、食管癌细胞系泶锼皆陡哂谙嘤Φ颓窒南赴怠8弑泶顴的细胞系在体内化或运用反义寡核苷酸技术抑制肿瘤细胞的泶锖螅琢鱿赴巫R坡明显下降,体外侵袭性显著降低。在肝细胞肝癌中的表达及其在门静脉癌栓形成和肿瘤粘附侵袭中的作用
材料和方法目前关于斡胫琢稣掣阶R魄窒矫娴难芯浚饕2嘀赜贓在肿瘤中的表达与肿瘤侵袭的关系、攵嘀窒赴砻嬲掣椒肿拥慕岷弦约坝喙氐暮笮藕糯ǖ纪揪斗矫妫赜贓与肝癌侵袭、门静脉癌栓形成的关系及其机制尚无明确报道,也较少关于斡胂赴け砻嬲掣椒肿鞍卓梢酝ü嘀滞揪兜鹘谙赴羌艿母谋洌斡胫琢鱿赴掣胶颓袭。活化的鞍追肿覥端与肌动蛋白微丝侧端结合后能够促进肌动蛋白聚合,,从而调节局部肌动蛋白细胞骨架的重建,参与细胞的各项活动。另外,活化的肿幽芄患せ頡蛋白酶,而鞍酌敢彩堑鹘诩《鞍紫赴羌苤亟ǖ墓丶肿印脂质体转染反义寡核苷酸是一种成熟有效的基因干扰技术,通过脂质体将人工合成的能够与目标基因特定序列结合寡核营酸导入细胞内,抑制目的基因翻译过程,从而抑制目的基因的表达。各种研究表明,选择适当的脂质体和设计良好的反义寡核萤酸能够显著抑制相应基因的表达水平。细胞松弛素芄灰种萍《鞍椎木酆希佣芄灰种萍《鞍孜⑺產由欤抑制肌动蛋白细胞骨架的重建。人肝癌细胞株、、均由复旦大学肝癌研究所建立,三者均自肝癌细胞系分离所得,遗传背景相同但侵袭能力依次增加收集我所年病理诊断为肝细胞肝癌的手术切除标本例及相应癌旁肝组织和诹夹愿尾「巫橹偷鞍妆泶锼郊胺植迹⒃擞弥侍遄H痉义寡核苷酸赴鸈表达,比较转染前后细胞粘附、运动和侵袭能力的改变,并且运用双重免疫荧光技术观察粘附过程中拖赴砻嬲附分子分布改变,运用反义寡核苷酸和细胞松弛素种艵和肌动蛋白聚合,比较拖赴砻嬲掣椒肿拥姆植几谋洹聚集的研究。和免疫组化技术检测不同侵袭潜能肝癌细胞系和肝癌组织标本的应用、诟蜗赴伟┲械谋泶锛捌湓诿啪猜霭┧ㄐ纬珊椭琢稣掣角窒械淖饔中文摘要
结果在肝癌细胞系和肝癌组织中的表达不同侵袭能力肝癌组织表达水平差别较大。三株肝癌细胞系均表达,但表达水平有明显差异、直鹞。夹愿尾「巫橹疎/平均值为.,例癌周肝组织產平均值为.,例低侵袭肝细胞肝癌其癌组织苙/.骄滴狾..,例高侵袭肝细胞肝癌组织藼平均值为┧ㄗ橹疎/產平均值为.。统计学检验表明,癌组织表达显著高于癌周肝组织,合并门静脉癌栓的高侵袭性肝癌组织表达显著高于低侵袭性肝癌组织,0┧ㄗ橹泶锔哂谙嘤Π┳橹。二、检测不同肝癌细胞系和肝癌组织中鞍妆泶肝病肝组织,,尺桓咔窒愿伟┲琢鲎橹粜月氏灾哂诘侵袭性肝癌,算值,尺、卵三株细胞系均表达鞍祝珽在胞浆呈棕色颗粒分布,三株细胞鞍妆泶锴慷纫来卧黾印咔窒蜗赴癌中例癌组织呈阳性%渲喜⑷庋勖啪猜霭┧ㄕ咧,例无门静脉癌栓者粜.。例低侵袭肝细胞肝癌组中齤冲瘤组织呈阳性%A夹愿尾「巫橹例,其中粜%在胞浆呈棕色颗粒分布,并沿细胞膜内侧线性增强分布。:癌周组织阳性表达以弥漫性为主。部分与周围组织交界处的肿瘤侵袭前缘组织表达略强