文档介绍：一、目的与要求:
    1、明确亚***盐的测定与控制成品质量的关系。
    2、明确与掌握盐酸萘乙二***法的基本原理与操作方法。
    二、原理:
    样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下***盐与对氨基苯磺酸重氮化后,生成的重氮化合物,再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料,产生的颜色深浅与亚***根含量成正比,可以比色测定。反应式如下:
    三、试剂与仪器
    1、亚铁***化钾溶液:称取106克亚铁***化钾[)],溶于水后,稀释至1000毫升。
    2、乙酸锌溶液:称取220克乙酸锌[Zn(CH2C00)2·2H20],加30毫升冰乙酸溶于水,并稀释至1000毫升。
    3、饱和硼砂溶液:称取5克硼酸钠(Na2B07·10H20),溶于100毫升热水中,冷却后备用。
    4、%对氨基苯磺酸溶液:,溶于100毫升20%的盐酸中,避光保存。
    5、%盐酸萘乙二***溶液:***,溶于100毫升水中,避光保存。
    6、亚***钠标准溶液:***钠,加水溶解移入500毫升容量瓶中,并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于200微克亚***钠。
    7、亚***钠标准使用液:临用前,吸取亚***,置于200毫升容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于5微克亚***钠。
    8,小型绞肉机。
    9、分光光度计。
    四、操作方法:
    1、样品处理:,置于50毫升烧杯中,,搅拌均匀,以70℃左右的水约30毫升将样品全部洗入500毫升容量瓶中,置沸水浴中加热15分钟,取出后冷至室温,然后一面转动一面加入5毫升亚铁***化钾溶液,摇匀,再加入5毫升乙酸锌溶液以沉淀蛋白质,加水至刻度,混匀,,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤弃去初滤液30毫升,滤液备用。
    2、测定
    吸取40毫升上述滤液于50毫升比色管中,、、、、、、、、***钠标准使用液(相当于0、1、2、3、5、7、10、***钠),分别置于50毫升比色管中,%对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3-%盐酸萘乙二***溶液,加水至刻度,混匀,静置15分钟,用2厘米比色杯,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。
    计算:  X=(A×1000)/(m×40/500×1000×1000)
    X:样品中亚***盐的含量,g/kg;
    m:样品质量,g;
    A:测定用样液中亚***盐的含量,ug.
Qq乳与乳制品中亚***盐的测定:
亚***盐广泛存在于自然界,在乳与乳制品中都有一定的含量。现已证明,亚***盐与食品中固有的***类化合物是产生致癌物质-亚硝***的前体物质,是潜在的致癌物质,亚***盐含量过高会引起高铁蛋白症。因此,对乳与乳制品亚***盐含量的检测和控制是非常有必要的。
在乳与乳制品测定亚***盐的过程中,将样品沉淀脂肪和蛋白质后,进行过滤。在滤液中加入磺***和N-1-萘基-乙二***二盐酸盐,使其显粉红色,然后用分光光度计在其最大吸收波长538nm下测定其吸光度。将测得的吸光度与亚***钠标准系列溶液的吸光度进行比较定量。
1 主要试剂和仪器
:UV-2550型紫外可见分光光度计(岛津有限公司)
:
标准亚***盐溶液:GBW(E)0802230504水中亚***盐-氮,浓度:100mg/mL,;
硫酸锌溶液:535g/L;亚铁***化钾溶液:172g/L;
盐酸-氨水缓冲溶液:~;
显色液1:盐酸:水= 450:550(V:V)盐酸溶液;
显色液2:5g/L磺***溶液;
显色液3:1g/L萘***盐酸盐溶液。
试验中所用试剂均为分析纯,所用水为去离子水。
2 试验方法
国标《GB/-1997 乳粉***盐、亚***盐的测定》中规定最大吸收波长为538nm,但在实验过程中,做光谱扫描时,最大吸收波长往往因为样品的不同而发生变化,发上红移或蓝移的现象。考虑到测定的灵敏度,应采用最大吸收波长作为入射光波长。所以,在进行定量分析之前,应先才用光谱扫描进行峰形和峰位的确认。
以表1的仪器条件,对亚***盐标准系列进行扫描,光谱图如图1。图1中曲线均比较平滑,为了消除干扰组分的吸收,采用“吸收最大,