文档介绍：复旦大学
博士学位论文
I型糖尿病的基因治疗研究
姓名:盛卫忠
申请学位级别:博士
专业:外科学
指导教师:秦新裕
20040425
⋯.~论文使用授权声明论文独创性声明一本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明本人完全了解复旦大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅:学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此作者签名:并表示了谢意。规定。导师签名:.日期:。
吞悄虿〉幕蛑瘟蒲芯吞悄虿∮殖莆R鹊核饕览敌吞悄虿。粲谧陨砻庖咝约膊。怯捎诨白产物,从而达到治疗疾病的目的。对于吞悄虿《裕鹊核鼗蛑瘟平一种理想的治疗方式。通过将胰岛素基因导入不受自身免疫攻击的非赴分:⒏咝У囊鹊核鼗蜃R葡低常、根据血糖浓度调控胰岛素表达与释放的有生物活性的胰岛素的生化机制。尾静脉液压法结合探索吞悄虿』蛑瘟频男路椒ā关键词:吞悄虿。蛑瘟疲琺,乙酰辅酶然福簿猜鲆貉狗体选择性攻击胰腺赴斐蒔细胞大量破坏、胰岛素分泌严重不足,表现为高血糖和酮症酸中毒。近二十年来,我国糖尿病的发病率呈上升趋势,已成为继恶性肿瘤和心脑血管疾患后排第三位的慢性非传染性疾病。对于吞悄虿∧壳翱行的治疗方法主要包括:胰岛素注射,胰腺或胰岛移植。传统的胰岛素注射疗法不能提供足够的血糖控制,亦不能预防长期并发症的发生,并影响患者的生存质量。胰腺或胰岛移植被认为是治愈吞悄虿〉挠行侄危枪┨宀蛔恪⒆陨免疫反应、供体存活率低和代价昂贵等问题限制了这一疗法的广泛应用。基因治疗通过一定的载体将治疗基因导入患者体内,使其表达有功能的蛋使之表达胰岛素,行使代替赴墓δ埽佣锏酱痈旧现斡鶬型糖尿病的目的。而一个成功的胰岛素基因治疗的系统至少应该包括以下鲋匾W槌刹调控系统;⒀≡褚桓鲇凶爬嗨细胞生化特性的合适的靶细胞,同时该靶细胞又不是自身免疫攻击的目标;邢赴写嬖诮鹊核卦庸こ晌3墒斓摹为此我们在获得能在非赴斜泶锍墒煲鹊核氐耐槐涞娜艘鹊核卦璫的试验基础上,研究具有葡萄糖应答能力的启动子,将整合酶及启动子葡萄糖应答能力的实验研究乙酰辅酶然是长链脂肪酸生物合成的限速酶,中文摘要整合酶启动博士论文盛卫忠
子呈组织特异性分布并具有葡萄糖应答能力。通过椒ɑ竦么笫驛动子序列,用它构建绿色荧光蛋白屯槐涞娜胍鹊核卦璫整合酶中榈既艘鹊核卦璭瘟芐糖尿病小鼠的实验研究尾静脉液压法能够大大提高基因转移效率,并且将外源咝У氐既敫卧唷6卧嗾腔蛑瘟频睦硐氚斜曛弧坏闾匾煺合酶系统能够实现外源谒拗魅旧迳系恼希佣迪殖て诒泶铩Sτ—及整合酶中泶镏柿钡既隨诱导的糖尿病小鼠体内,使泶锟蚣芪坏闾匾斓卣先胄∈笕旧錎中,持续表达岛素水平显著升高,小鼠体重增加,葡萄糖耐量试验接近正常。在街な在小鼠肝脏有效表达。实验证明整合酶中哂薪榈纪庠碊在体内的位点特异整合能力,与尾静脉液压法结合应用将是糖尿病基因治疗研究的有用工具。的表达载体,瞬时脂质体法转染赴觳獠煌咸烟桥ǘ扰嘌跫孪赴中目的产物的表达水平。结果表达,表达量受葡萄糖浓度调控。在高糖培养条件下人胰岛素产量是低糖条件下启动子可以作为糖尿病基因治疗研究的有用工具。尾静脉液压法将携带位点的、突变后的人胰岛素泶镏柿胰岛素。质粒注射后,治疗组糖尿病小鼠血糖水平恢复正常并维持埽G逡坏闾匾斓卣先胄∈蟾卧嗳旧寮賏坏恪C庖咦榛觳庵な祄启启动子在赴心芄磺康幕虻的丁博士论文盛卫忠
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前言机体对自身胰腺中的序细胞进行持续攻击,造成口细胞大量破坏,从而导致胰岛素分泌的严重不足而引起的一种代谢性疾病⋯。近年来糖尿病的发病率呈上升趋注射外源胰岛素是目前治疗糖屎病的主要手段,但是外源胰岛素注射不符合但有引起低血糖和过度体重增加的风险【俊R鹊核氐目诜臀爰列筒荒艽痈有效手段,但是供体严重不足、自身免疫反应、价格昂贵、胰岛分离纯化困难及条崭新的途径。基因治疗通过一定的载体将治疗基因导入患者体内代替或置换致的。然而,仅仅简单的通过胰岛素基因的异位替代表达,远不能实现治疗吞尿病的目的。吞悄虿』蛑瘟频墓丶谟谝鹊核鼗虮泶锏目焖俸途傅难糖调控以及高效持久的表达。胰岛素基因表达、释放必须要受血糖浓度变化的快效、持久表达,否刚就不可能达到治疗效果【.蛞6桓龀晒Φ囊鹊核鼗蛑瘟吞悄虿。直怀莆R鹊核匾览敌吞悄虿。且恢肿陨砻庖咝约膊。捎势,我国糖尿病患者超过万