文档介绍：2018/6/14
L600高效液相色谱仪的使用方法
L600 high performance liquid chromatograph
孙逸来
第一节高效液相色谱的工作原理
一、高效液相色谱的原理
二、高效液相色谱的特点
三、高效液相色谱的优点和缺点
一、工作原理
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
二、特点
:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。

三、高效液相色谱的优点和缺点

高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。高速是指在分析速度上比经典液相色谱法快数百倍。由于经典色谱是重力加料,流出速度极慢;而高效液相色谱配备了高压输液设备,流速较快。

2. 缺点
目前高效液相色谱法已被广泛应用于分析对生物学和医药上有重大意义的大分子物质,例如蛋白质、核酸、氨基酸、多糖类、植物色素、高聚物、染料及药物等物质的分离和分析。但是高效液相色谱法的仪器设备费用昂贵,操作严格,这是它的主要缺点。
第二节 L600高效液相色谱仪的结构组成和基本技术参数
流动相
高压输液泵
紫外检测器
柱温箱
进样器
一、L600高效液相色谱流程图
溶剂
色谱泵
进样器
HPLC色谱柱
检测器
废液
数据处理系统
二、基本技术参数
图2-1 高压输液泵参数
图2-2 紫外检测器的参数
图2-3 进样器参数