文档介绍：第三军医大学
博士学位论文
NSCLC表达FasL对TIL的影响及患者血清中可溶性Fas、FasL的检
测
姓名:张国强
申请学位级别:博士
专业:外科学(胸心外科学)
指导教师:蒋耀光
20040501
第三军医大学博士学位论文
实验研究部分

NSCLC 表达 FasL 对 TIL 的影响及患者血清中
可溶性 Fas FasL 的检测

摘要

Fas 又称 APO- 现命名为 CD95 分子是一种能够传递死亡信号的细胞表面分
子属于肿瘤坏死因子受体家族成员是一种型细胞膜蛋白其天然配体为 FasL
属于肿瘤坏因子家族成员是一种型跨膜蛋白通常表达于 T 细胞巨噬细胞及角
膜等少数免疫特赦部位当 Fas 与 FasL 结合就会导致细胞凋亡在肿瘤免疫中人们过
去认为 Fas-FasL 途径是 CTL 杀伤肿瘤的作用机制之一但最近研究发现一些肿瘤细胞
如肝癌结肠癌细胞也表达 FasL 但并不介导肿瘤细胞自身凋亡却能借助 FasL Fas
途径反杀伤活化的肿瘤浸润淋巴细胞 TIL 这也是肿瘤免疫逃避的新机制反杀伤
机理的研究可望开辟肿瘤免疫治疗的新途径
长期以来肿瘤免疫治疗研究的着眼点多集中在如何激活淋巴细胞特别是 T 细胞
但激活的 T 细胞膜表面 Fas 表达上调较静止 T 细胞更易受致肿瘤细胞的反杀伤因
此我们认为不克服肿瘤细胞的免疫反杀伤免疫治疗就会失败由于 FasL 抗体能竞争
性地与 FasL 结合从而有效阻断 FasL-Fas 途径传递死亡信号因此 FasL 抗体具有保
护 T 细胞免受肿瘤细胞的免疫反杀伤作用这一研究潜在的社会效益和经济效益颇大
根据上述理论国外有学者进行过动物实验并观察到反杀伤作用的存在而临床
研究国内外均未见报道因此我们用病人手术切除之新鲜肿瘤组织作为标本分离制
备淋巴细胞和肿瘤细胞并分别作靶细胞和效应细胞观察肿瘤细胞对淋巴细胞的反杀
伤作用实验结果更贴近临床
基于上述认识本课题从以下几个方面展开了研究分析非小细胞肺癌 NSCLC
中肺腺癌及腺癌细胞株 A549 FasL 的表达情况及其临床意义检测肺腺癌细胞及腺癌
细胞株 A549 对 TIL 的杀伤活性及 FasL 抗体对 TIL 的保护作用检测肺癌患者外周血
中 sFas 及 sFasL 的表达情况及临床意义
通过以上研究我们发现
1 肺腺癌及腺癌细胞株 A549 FasL 的表达
8 例肺腺癌患者中 FasL 表达阳阳性率为 % 而腺癌细胞株 A549 的阳性表达
率也达到了 % 提示肺腺癌细胞及 A549 细胞具有反杀伤免疫细胞的能力并推测
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第三军医大学博士学位论文
有可能是肺腺癌易发生转移的重要原因之一
2 肺腺癌细胞及 A549 对 TIL 的杀伤作用及 FasL 抗体对 TIL 的保护作用
肺腺癌细胞及 A549 培养 1 2 周后用 MTT 法测定其对 TIL 的杀伤活性 8 例经
IL-2 培养的肺腺癌细胞及 A549 均对肺癌组织分离培养的 TIL 细胞有不同程度的杀伤作
用但经 FasL 抗体封闭后的肿瘤细胞对 TIL 的杀伤作用均有所下降两组之间存在显
著差异 p<
3 肺癌患者外周血 sFas 及 sFasL 的表达
18 例肺癌患者其中鳞癌 8 例小细胞癌 1 例低分化癌 2 例腺癌 7 例 sFas
及 sFasL 的水平显著高于正常人 8 例健康志愿者提示可溶性 Fas 与膜 Fas 竞争
性地与 FasL 结合抑制肿瘤细胞凋亡可溶性 FasL 可能通过转式机制导致别的表达
Fas 的免疫细胞发生凋亡从而使肿瘤细胞躲避免疫攻击
通过本研究我们得出如下结论 1 肺腺癌细胞及 A549 细胞高度表达 FasL 2
肺腺癌细胞及 A549 细胞对 TIL 均有不同程度的杀伤作用而 FasL 抗体对 TIL 具有一定
的保护作用提示 Fas-FasL 途径是肿瘤免疫逃避的途径之一 3 肺癌外周血中 sFas
及 sFasL 显著增高并可能是肺癌免疫逃避的机制之一
关键词非小细胞肺癌肺腺癌 A549 TIL FasL sFas/sFasL 反杀伤
免疫逃避

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第三军医大学博士学位论文
实验研究部分

Effect of NSCLC expressing FasL on TILs and
detection of sFas and sFasL in serum

ABSTRACT
Fas (APO-1, CD95) is a type integral membrane