文档介绍：小柴胡汤对HL
【摘要】目的观察小柴胡汤对HL-60白血病细胞的体外分化诱导作用,并初步探讨其作用机制。方法通过药物作用后观察细胞形态学的变化,细胞吞噬功能及硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力的改变;流式测定细胞周期改变和免疫组化检测抑癌基因P53的表达变化初步揭示其作用机制。结果小柴胡汤能使HL-60细胞显著向成熟粒系细胞分化而且吞噬功能、NBT还原能力出现增强的趋势,以中、高剂量组最为显著(P );并使 HL-60的细胞周期阻滞于G0/G1期,S期细胞数减少,抑癌基因P53表达明显升高(P )。结论小柴胡汤可诱导HL-60细胞向粒系成熟分化;其作用机制可能与阻滞细胞于G0/G1期,并且上调抑癌基因P53的表达有关。
【关键词】小柴胡汤 HL-60 分化诱导
Abstract:ObjectiveTo observe the effects of HL-60 cell differentiation induced by Xiaocaihu decoction and to discuss its cells differentiation e changes of cytomorphology, the cell setry and anti-oncogene P53 expression by immunity histochemistry, the mechanism ature granulocyte morphologically and HL-60 cell phagocytosis and NBT reduction ability arkedly in middle-dose and high-dose Xiaochaihu decoction groups(P ). pared ount in S phase iddle-dose and high-dose Xiaochaihu decoction groups and P53 expression ature granulocyte by Xiaocaihu decoction and the mechanism may be related l药液;,, mg/ml的稀释液;过滤消毒,-20℃保存。全反式维甲酸(sigma公司产品,批号:20050510):ATRA先配制成浓度为10-1mol/ml的储存液,使用前用无血清RPMI1640培养液配制至终浓度为10-6mol/ml的稀释液;RPMI1640培养基(GIBCO公司产品,批号:1402027);硝基四唑氮蓝(sigma公司产品,批号:1202775);佛波酯(sigma公司产品,批号:290452);聚苯乙烯颗粒(sigma公司产品,批号:1705027)。
试剂鼠抗人P53单抗(晶美生物工程有限公司,批号:0603138);即用型SABC(过氧化物酶)免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司,SA1022);DAB显色剂(北京中山生物技术有限公司,ZLI-9032,Lot:20168834)。
2 方法
细胞培养与分组将H