文档介绍：.15
.15
16
PCR产物纯化及回收 16
16
16
PCR阳性鉴定 .16
.16
17
17
一17
17
1 7
1 8
.18
1 8
: 1 9
1 9
(Western blot) 19
O亚细胞定位 .20
..2 1
.21
RNA样品的准备 .2l
RNA样品的质量检测 .2 1
..2l
。2l
3结果与分析 一23
OsDRxocl基因的病原诱导表达分析 .23
OsDRxocl亚细胞定位分析 .24
OsDRxocl具有转录激活的功能 .24
万方数据
OsDRxocl在水稻中的表达模式 .25
OsDRxocl转基因水稻植株Tl代接种检测 26
Tl代植株对细菌性条斑病的抗性检测 26
Tl代植株对白叶枯病的抗性检测 28
OsDRxocl转基因水稻植株Tl代叶绿素含量的测定 32
33
OsDRxocl转基因植株转录组测序 .34
34
34
34
35
36
36
OsDRxocl转基因植株转录组测序结果分析 37
37
.37
.40
42
一42
44
OsDRxocl融合GFP基因的遗传转化 .47
OsDRxocl融合GFP载体的构建 ..47
:: .48
.48
.49
.50
4讨论 .j 5 l
OsDRxocl作为MYB类转录因子参与水稻抗病反应的探究 ..5l
OsDRxocl基因参与抗病反应路径的探究 .52
OsDRxocl基因对叶绿素影响的探究 .52
III
万方数据
5结论 ..54
OsDRxocl参与正调控细菌性条斑病、负调控白叶枯病的抗性过程 .54
OsDRxocl基因影响叶绿体的发育 .54
.55
参考文献 。56
附录I .67
附录Ⅱ .69
致谢 。72
攻读学位期问发表论文情况 .73
IV
万方数据
山东农业大学硕士学位论文
中文摘要
水稻白叶枯病和细菌性条斑病是重要粮食作物水稻上的两种主要细菌性病害,严重地影响着我国水稻的产量和品质。它们均是由稻黄单胞菌不同致病变种引起的,侵染方式和发病特点却有很大的差异。在水稻白叶枯病抗病基因的研究中,已经发现并克隆了很多抗性基因。但在水稻细菌性条斑病的抗性研究中,只在玉米中克隆到一个非寄主抗
性基因Rxol,在水稻中尚未克隆出一个抗性基因,只发现了少量与该病相关的QTL。
OsDRxocl编码含有类Myb DNA结合结构域的未知功能蛋白,与细菌性条斑病抗性效应很大的一个QTL qBlsr5b遗传位置相当。此前陈明通过在水稻中对该基因超量和抑制表达发现,在To代转基因植株上观察到对这两种水稻细菌性病害的抗性发生变化,
OsDRxocl可能参与正调控水稻对细菌性条斑病的抗性而负调控水稻对白叶枯病的抗性,有望揭示两种病害