文档介绍：摘要
杠柳(Periploca sepium Bge)为萝蘼科杠柳属植物,耐性好,具有广泛的适应性。是优良的固沙、水土保持、边坡绿化和煤矸石山生态恢复树种,也是我国传统中药材。随着杠柳药理作用以及生态效益的不断丌发,市场需求增加,使得杠柳出现过度采挖, 但其种苗繁育迟缓,货源少,进一步开展资源保护利用及人工培植工作困难重重。我国杠柳分布广泛,但是对杠柳分子水平研究非常缺乏,多集中于生理药理研究。本研究以河北省不同地理位置生长的杠柳为研究材料,利用ISSR分子标记方法对其遗传多样性进行研究,主要研究结果如下:
、SDS法、试剂盒提取杠柳叶片DNA,通过浓度以及纯度检测,结合电泳图谱,确定了适用于杠柳ISSR分析的基因组DNA提取方法为改良CTAB法。
,对随机选取的杠柳样本进行检验,进一步筛选条多态性高、稳定性好的引物,通过检测,34条引物具有多态性,其中多态性高效率引物8条。利用8条高效ISSR引物对11个不同地区的杠柳样本进行PCR检测,共检测到位点79个,其中多态性位点63个,%。
、模板DNA浓度、退火温度、循环次数等因素的研究,建立了适合杠柳基因组的ISSR反应体系:总反应体积259L,其中Taq MasterMix,, 模板DNAIpL,正向引物和反向引物各1pL,。
,得相似性矩阵。遗传相似系数(GS)可以揭示不同地区种质间彼此遗传关系远近,GS值越大说明材料间亲缘关系越近;GS值越小表明亲缘关系越远。"~,其中供试样品6与9亲缘关系最近,,供试样品6与lO亲缘关系最远,。结果表明,不同地区杠柳种质资源遗传差异比较显著。
,通过Tree plot模块生成聚类分析树状图。1 ,第1类为来自石家庄赞皇、邢台内丘、沙河、邯郸涉县和武安的样品。第 1I类共包括5份种质,分别来自于保定易县、满城、阜平、涞水、涞源。来自张家口的样品作为单独一支为第1II类。由此可见,杠柳种质亲缘关系与地理分布呈一定相关性,其生长区域越近其亲缘关系越近,充分体现了地域分布和环境对杠柳的影响。
关键词:杠柳;ISSR标记;遗传多样性;聚类分析
万方数据
ic Diversity Analysis of Periploca sepium in Hebei Province by ISSR
Markers.
Author:Di Kuiying Supervisor:
Major:Garden plants and ornamental gardening
Abstr’act
Periploca(Periploea sepium Bge)is asclepiadaceae periploca plants,having good tolerance and a wide range of it not only is the tree species for soil keeplng and water conservation,slope revegetation,ecological restoration of coal gallgue
piles,but also is traditional Chinese medicinal the exploitation ofpefiploca pharmacological effects,continuous developing of ecological benefits,and increasing demand of market,it Occurs that periplocas have been ,because of its
slow seed。breeding,small supply,further resources protection and utilization work di伍cult.
tnere are lots of problems to cultivate periploca in