蛋白质变性与复性.ppt

文档介绍：蛋白质的变性与复性
一、蛋白质变性
(一)为什么要研究蛋白质变性?
三个阶段:
1、吴宪,变性现象的观察
2、研究变性与蛋白质分子形状的关系→
变性与蛋白质分子构象
3、研究蛋白质变性和复性的动力学、热力学
(二)变性概念
涉及构象变化,二硫键的断裂及侧链基团的化学修饰
吴宪:
天然蛋白质分子从紧密有序的结构
松散无序结构的过程。
缺点:没有与生物活性的变化联系
由于外界因素的作用,使天然蛋白质分子的构象发生了异常变化,从而导致生物活性的丧失以及物理、化学性质的异常变化,这种现象称为蛋白质的变性(denaturation)。
变性可以涉及次级键、二硫键的断裂
但不涉及一级结构上肽键的断裂
蛋白质的变性作用与变构效应有何区别?
变性蛋白的特征:
a)生物活性丧失,
b)抗原性改变
c)理化性质改变:溶解度下降(沉淀)、结晶能力丧失、特性粘度增加、扩散速度下降等。
d)生化性质改变:易被蛋白质水解
(三)蛋白质变性的鉴定方法
1、观察蛋白质的溶解性是否下降、凝集、
变性? 沉淀
2、以天然蛋白质作对照,测定蛋白质物理性质的变化
旋光法和圆二***、紫外差示光谱、
粘度法、电泳法
3、测定蛋白质化学性质的变化
侧链基团与专一试剂的反应性,蛋白酶对蛋白质的水解速度
4、沉淀测定蛋白质(酶)的比活性
5、测定蛋白质的抗原性是否改变,抗体能否与抗原专一性结合
(四)各种变性因素对蛋白质构象的影响