1-凯氏定氮法.ppt

文档介绍：实验1
微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量
实验目的
食物中蛋白质含量是评价食物蛋白质质量的最基本指标。因为食物中尚有尿素氮等非蛋白氮,故该法测定值为食物中粗蛋白质含量。该法还可以用于测定尿氮、粪氮,是计算食物蛋白只消化率和利用率的基础数据。通过本实验有助于了解微量凯氏定氮法测定蛋白质的原理、方法与意义,蛋白质系数在蛋白质含量计算中的应用,掌握该法的一般操作过程。
实验原理
有机物中的氮在强热和浓硫酸作用下,消化成硫酸铵,在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏稀释放出氨,收集在硼酸液中。再用已知浓度的盐酸标准溶液滴定,根据盐酸消耗量计算出氮含量,然后乘以相应的系数,评出蛋白质含量。
实验步骤
:用扭力天平称取200mg左右的黄豆粉,记录准确用量。如样品含水量大,应先蒸发或烘干。
:凯氏烧瓶内加玻珠三粒,K2SO4(一小匙)。10%CuSO4 2mL及浓硫酸5mL,加入100mL的凯氏烧瓶;同时作一空白对照,摇匀。凯氏烧瓶置于电炉上加热,防止溶液起泡外溅,使样品全部溶于硫酸内。样品中泡沫消失后可适当调高消化温度,直至烧瓶内液体变为透明或微蓝绿色为止。自然冷却。
:将液体全量转移至100mL容量瓶,凯氏烧瓶用蒸馏水冲洗数次,将洗液一并移入容量瓶。待溶液完全冷却后用蒸馏水定容至100mL刻度。
:
1)吸取硼酸溶液10mL于锥形瓶中,加入两滴指示剂(***红-亚***兰混合指示剂)。将锥形瓶置于冷凝管下,氨气收集管口浸入硼酸液中。呈蓝灰色
2)准确吸取样品消化液5mL、 20% NaOH 5mL,从加样口进入反应室,少量蒸馏水冲洗加样口,迅速关闭加样口,并加少量蒸馏水封液,防止漏气。(每组三个平行样,一个空白样。由于试剂不纯