文档介绍：第一节抗体的制备
抗血清:指抗原人工免疫实验动物,获得含
特异性抗体的血清。
多克隆抗体(PAb): 多个抗原决定簇免疫机体
所产生的多种抗体的混合物。
单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb) :
只针对某一特定的抗原决定簇,纯度高的抗体。
第四章抗原抗体反应及应用
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一、抗血清的制备
1、免疫动物
抗原
佐剂
免疫动物
2、抗血清的纯化与保存
采血
纯化与保存
3、抗血清的鉴定
效价
亲和力
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Affinity = attractive and repulsive forces
Ab
Ag
High Affinity
Ab
Ag
Low Affinity
Affinity
Strength of the reaction between a single antigenic determinant and a single bining site
Calculation of Affinity
Ag + Ab Ag-Ab
Keq =
[Ag-Ab]
[Ag] x [Ab]
Applying the Law of Mass Action:
二、单抗的制备
1、单抗的制备原理
2、单抗的制备方法
抗原提纯和动物免疫
骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备
细胞融合
筛选阳性株
单克隆抗体的制备和冻存
单克隆抗体的纯化 GO
骨髓瘤细胞脾脏淋巴细胞
( HGPRT-TK- ) (HGPRT+TK+)
在HAT中不能生长体外培养过程中死亡
↓←PEG
杂交瘤细胞
(HGPRT+、TK+)
↓
在HAT中大量长期繁殖
↓
克隆化
↓
产生单抗
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