文档介绍：实验性质:综合性
实验:激素对血糖浓度的影响
--------------- 邻甲苯胺法测血糖
一、目的及要求

。
。

并解释其作用机制。
二、原理:
3H2O
冰乙酸, 沸水浴
1)葡萄糖 5-羟甲基-2-呋喃甲醛
2) 5-羟甲基-2-呋喃甲醛+ 邻甲苯胺
西夫氏碱(蓝绿色)
3)同样处理标准管与样品管
三、试剂:(略)
四、操作步骤:
实验分组:2 大组/ 实验室,即胰岛素组和
肾上腺素组。

4 或 5 小组/ 大组,即胰前和胰后组
或肾前和肾后组。
1、取预先饥饿 14-16 小时的正常家兔 2只,
称重。
2、从耳缘静脉采血:剪毛→二甲苯棉球擦
拭→干棉球擦干→碘酒、酒精消毒→
7号针头穿刺取血→放入加有抗凝剂(草
酸钠:2mg / ml)的烧杯中→摇匀。
3、1只家兔肌肉注射胰岛素( 5U / Kg , 规格:
5U / ml ),另一只家兔皮下注射肾上腺
素( mg / 只,规格: mg / ml )。

4、30分钟后,分别从耳缘静脉取血或心脏
取血。
5、无蛋白血滤液的制备:
取短试管 4只,各加胰前、胰后、肾前、肾后等抗凝血 ml,用滤纸擦净粘附于吸管尖端外表面的血液,再加入 5%三氯醋酸 ,边加边摇,充分混匀。待血液由鲜红色变为暗红色(或酱油色),3000rpm 离心5min,上清即为无蛋白血滤液。
6、取试管 6 支,编号,按下表操作(单位:ml)
H2O —————
标准液— ————
胰前无蛋
白血滤液—— ———
胰后无蛋
白血滤液——— ——
肾前无蛋
白血滤液———— —
肾后无蛋
白血滤液—————
邻甲苯胺试剂
空白管标准管胰前管胰后管肾前管肾后管
各管分别混匀,同时置于100℃水浴加
热8分钟,流水冷却。630 nm进行比色,
以空白管校正零点,读取各管光密度。
五、计算
血糖(mg%) = / × × 1
× 1 / × 100
= / × 100
六、注意事项:
1、采血及注射激素时,应尽量使家兔保持安
静。
2、由于血细胞不断从血浆摄取葡萄糖加以利
用,因此, 采血后及时进行检测,否则血
糖浓度将逐渐降低。
3、取血量要准确。