文档介绍：MET基因复制数量的增加赋予单克隆抵抗体抗MET的能力并且建立药物依赖性
关键词:MET ,MV-NV30单克隆抗体,酪氨酸激酶抑制剂,抗性,药物依赖性
【摘要】:被MEI原癌基因编码的酪氨酸激酶受体领导了具体抑制剂的发展并在癌症中起很重要的作用,其中现在一些正处于前进的临床试验阶段就以前的经验表明对大多数靶向治疗最主要的限制是抗性的出现。在对MET单克隆抗体抗性和抗体对化学抑制剂旁路抗性(反之亦然)一无所知时,酪氨酸激酶抑制剂对MET的抗性机制就已经被提出。EBC1型肺癌细胞是MET基因扩增的结果,并且这种细胞对MET抑制剂非常敏感,包括MET单克隆抗体的单机形式在内。我们培养生成抵抗抗体的细胞发现这种抗性是由于MET基因大量复制扩增和它的受体显著表达而来。这种过度表达可以使单克隆抗体的“脱落”活动达到饱和,并且能够防止表面的MET受体的有效的下调和抑制剂的活化作用。值得注意的是MV-DN30抗体的抗性细胞是MET耐受细胞对MET酪氨酸激酶抑制剂也很敏感。除此之外,抗体抗性细胞还具有药物依赖性,MV-DN30的去处导致它们死亡是由于它们的过度信号表达。在实验中,对MET酪氨酸激酶抑制剂存在抗性的细胞仍然对MV-DN30抗体的作用敏感。结果表明一种不连续的通过抗体和化学激酶抑制剂联合治疗可能会使靶向治疗的临床反应和对MET抗体治疗旁路的抗性增加。
缩略语:MV-DN30--单价DN30,TKEs—酪氨酸激酶抑制剂,HGF—肝细胞生长因子,MAPK—有丝分裂原活化蛋白激酶

可以抑制一个特定的目标分子化合物的靶向治疗法开辟了治疗癌症的新道路。与主要杀死扩散细胞为主的传统化疗不同的是靶向药物对肿瘤细胞采取一种更具体的治疗方式。靶向治疗依赖于“癌基因沉瘾”的概念。这就意味着单个基因的抑制或死亡是由于它们的沉瘾,或者至少抑制它们的生长(温斯坦,2002)。临床试验中的特定抑制剂的发展给肿瘤细胞的“Achille’s heel”的识别提供支持(温斯坦和乔,2006)。
尽管靶向治疗在一部分癌症患者中取得了较优异的效果,还有重要的一点就是部分癌症病人对药物的选择表达没有起到治疗作用(原发性),除此之外,几乎总是一开始患者反应变成后来对治疗的抵抗和复发(继发性)。因此,最关键的就是要发现对治疗抵抗的机制并且找到绕过它们的方法。
癌基因和人类癌症密切相关,酪氨酸激酶起着决定性作用。这个观察发现许多肿瘤沉溺其中使得蛋白激酶成为了治疗癌症的理想目标(巴塞尔加,2006; Gschwind等人,2004)。在临床诊断中主要使用一种较小的激酶抑制剂和单克隆抗体来抑制酪氨酸激酶。酪氨酸激酶抑制剂是一种可以抑制靶蛋白酶活性的小分子物质。它们能有效地瞄准膜结合位点和细胞内的激酶并且很容易在体内扩散
。单克隆抗体已被广泛用于临床并取得了可观的成果。这些分子的优点在于它们具有很高的特异性。在癌症治疗中的可以抗癌的RTKs单克隆抗体已经被批准在乳腺癌和结肠癌中使用(分别针对HER2和表皮生长因子受体) 并可作为抗血管增生的药物(针对血管内皮生长因子受体)。除此之外,很多针对于其他目标的单克隆抗体正处与发展和试验阶段。最近,一种作为癌症治疗目标的RTK受到关注,这种RTK是由致癌基因编码的在肝细胞生长因子上的酪氨酸激酶受体。在和肝细胞生长因子结合后,MET活化并启动一个复杂的生化程序,这个过程被称作“浸润性上长”。在肿瘤组织中,浸润性生长的增进可以迫使肿瘤细胞从肿瘤组织中分解下来侵蚀基底膜,渗入基质中,甚至定居于新的组织中来实现转移。很多研究结果表明MET在人类的许多肿瘤中具有活性,并且它与对直接激酶疗法的持续抗性密切相关。除此之外,还表明细胞显示大量复制(超过8张)和随之而来的过度表达和独立配体的激活都是沉溺于这种致癌基因和抗MET药物的应答中。在前期设置得到的基本结果,几种特定的多目标的酪氨酸激酶抑制剂和直接针对于MET或者HGF的抗体已经进入了临床试验阶段。在活体和动物模型进行的研究已经表明用TKIs长期治疗会导致机体的治疗耐受性。对MET TKIs的抗性可能是由于一些机制,比如MET基因扩增,过度表达,MET点突变,MET平行路径的激活和KRAS基因的扩增机制。然而,关于对MET的单克隆抗体的再次具有抗性一无所知。
我们以前报道过主要针对细胞外的部分MET的抑制性单克隆抗体的研究进展。它的诱导、再结合、达到MET脱落阈值的能力使其有抑制活性,剩余的跨膜片段通过蛋白酶体降解途径处理掉。因此,DN-30结合到MET后的结果是使其变成可溶性的诱饵MET并且蛋白水解酶会讲解MET激酶。这促进了MET介导的生物活性的抑制作用。设计了这样一个过程就是因为DN-30的结合使得MET激酶部分活化并且导致抗体介导的受体同源二聚体化和单价Fab片段失