文档介绍：苦丁茶中熊果酸的提取工艺
(金华职业技术学院生物制药技术专业俞俊豪)
摘要:在苦丁茶中提取熊果酸的过程中,采用实验分析研究了乙醇浓度、液固比、提取时间、提取次数等与熊果酸提取率的关系。根据实验的分析结果表明:对于熊果酸的提取率,乙醇浓度与其关系最大,提取时间和固液比的影响次之;最佳回流提取工艺条件为:以90%乙醇水溶液为提取液,液固比为12:1,回流提取3次,每次提取3h 时,%。
关键词:苦丁茶;熊果酸;提取
引言
苦丁茶是冬青科冬青属植物,有散风热、清头目、除烦渴、降压和降脂等作用的功能。在我国至少有两千多年的产饮历史[1],其历史悠久且被广泛使用在我国南部及西南部的民间。现代药理研究结果表明,苦丁茶中的熊果酸既能降血脂,也能降肝脂,是具有开发潜力的降脂护肝药物[2-5]。熊果酸广泛存在于苦丁茶、批把叶、山楂叶、车前草、夏枯草等天然植物中。其中苦丁茶中熊果酸的含量较高,每100g苦丁茶含熊果酸达1g。但目前对苦丁茶的研究集中在确定其化学成分和药理作用两方面,对苦丁茶中熊果酸的提取与分离纯化缺乏系统的研究。为此,苦丁茶中熊果酸的提取工艺为广大研究人员研究的重心。
1 实验药品及仪器
药品:苦丁茶,在50 ℃时干燥,然后粉碎备用;乙醇、甲醇等,为分析纯;熊果酸标准样品,纯度为90%;蒸馏水,醋酸等。
仪器:电热恒温水浴锅;电子天平;BT8100 高效液相色谱仪;BT8200紫外可见检测;植物粉碎机
2 实验方法和分析
苦丁茶粗粉,分别加入浓度为60%,70%,80%,90%,95%的乙醇水溶液40 mL,在85℃水浴中回流提取3次,每次提取3h。3次提取液,测定并计算各条件下的提取率。
固液比对熊果酸提取的影响试验
在85℃时, 25,30,35,40,50 和60 mL,浓度为95% 的乙醇溶液回流提取3次,每次2h。合并3次提取液,测定并计算各条件下的提取率。
在85 ℃时, 苦丁茶粗粉按12∶1 的液固比加入60 mL浓度为95%的乙醇回流提取,提取3次,,,, h ,合并3次提取液。测定并计算不同提取时间的提取率。
在85 ℃时, g 苦丁茶粗粉加入40 mL体积分数为95% 的乙醇进行回流提取,分别提取1,2,3 和4 次,每次回流提取3 h 。合并提取液,测定并计算不同提取次数的提取率。
固定相为色谱柱(直径为10μm ,填料尺寸(高×直径)为250 mm× mm);流动相为甲醇、水和醋酸(体积比为90∶10∶0 .02),;检测波长为220nm;。
准确称取熊果酸标样, / L 的熊果酸标准溶液,作为测定样品的标准溶液。
g / L 的熊果酸标准溶液0,,,, mL,用甲醇定容至10mL,配制成标准系列。在色谱条件下,吸取上述溶液,分别进样6μL ,对每种浓