文档介绍：复旦大学
博士学位论文
癫痫发作致海马神经元凋亡的线粒体通路机制研究
姓名:李天富
申请学位级别:博士
专业:神经病学
指导教师:吕传真
20040508
本文常用编略词籪···】局部脑血濂抑制剂细胞色素凋亡蛋白酶激活因子捌亡抑制蛋白旧辶牡蛲抑制蛋白第‘鱿吡L逶吹せ钗铮苯的低等电点蛋白蛋白质转导域异丙基一狣虼乳糖苷甃甪瓺甪俊/猙—甤/籇—猼猤红藻氢酸脯电图半胱天冬蛋白酶与凋已抑制蛋白结合、.
癫痫发作致海马神经元凋亡的线粒体通路机制研究摘要征。复杂部分性发作导致患者海马选择性神经元死亡,海屿硬化,导致记忆力下降,精神和认知障碍乃至痴呆,严重威胁着人类的身心健康。选择性神经元死亡残率。动物实验研究发现,凋亡是颞叶癫痫或复杂部分性发作导致海马选择性神经元死亡的重要形式,癫痫发作激活了线粒体凋亡通路的和发挥了促凋亡与抑凋亡作用,决定了细胞的命运。亲饔米钋康牡蛲鲆种分离丽促进募せ睢9赜贐在癫痫发作致神经元凋亡的线粒体通路中的作用报道很少,而和/在此通路中的作用尚未见报道。为进一步阐明癫痫发作致神经元凋亡的线粒体通路机制以及寻找治疗癫痫发作致脑损伤的新靶点,我们用杏仁核注射诱导大鼠边缘叶发作模型,观察、/、—和诜⒆髑昂蟊泶锏谋浠并进一步证明了融合蛋白籖对癫痫发作致脑损伤的神经元第一部分杏仁核内注射诱导的边缘叶发作模型制作和致海马神经元凋亡的分布,狢⑿尤屎俗元凋亡和存活的变化。结果显示,药物注射~蠖锞旭拆锓⒆鳌K癫痫是殖<牧俅沧酆现ⅰB浴⑼环⑿院头锤纯贪逍苑⒆魑F淞俅蔡对人类复杂部分性发作癫痫的形成起重要的作用。对癫痫发作诱导神经元死亡机制的研究,有助于我们寻找有效的神经元保护剂,提高癫痫治疗的疗效,减少致。最近研究发现,在凋亡通路中很多蛋白参与了对牡骺兀蛋白,直接结合并抑制激活的、和:/通过去除对囊种贫俳鴆的激活;促凋亡蛋白邮凋亡信号后与伴侣蛋白保护,并探讨可能的作用机制。采用脑立体定位注射技术,以深部电极持续记录脑电和激光多普勒血流测定仪记录局部脑血流射红藻氨酸,盏嫉拇笫蟊咴狄斗⒆髂P停⒆缶猜鲎⑸/安定终止发作,分别用旧ê蚦旧ü鄄旌B砩窬有癫痫发作大鼠级脑电活动均较逗廷艏赌缘缁疃瘸鱿郑⒆髯棰艏赌缘活动缘缤加懈咂蹈卟ǚ约时程无明显著异。发作终止时,发作组选择性静嗪B鞢区出现旧粜韵赴达高峰,陆怠7复旦上学博士论文抽喜
第二部分杏仁核内注射诱导的边缘叶发作致海马神经元凋亡的线粒体通路机制第三部分融合蛋白择拆锓⒆髦履损伤的保护作用染色观察海马神经元存活和凋亡的变化,用免疫荧光和贙⑸渫嗪B鞢区细胞浆内/蛋自表达增加,存活神经元。发作后注射同侧海马窬猚一蚦一元细胞核,—脖泶锝隙哉占跎伲籏⑸涠圆嗪B砦醇觳獾絋,上述变化。以上结果提示,癫痫发作可诱导/蛋白从线粒体向细胞浆了癫痫发作致神经元损伤的病理生理机制,和可能是潜在的保作前后狢无明显变化。高频高波伏从集棘波时程越长,鳷染色阳性细胞越多。说明癫痫发作导致选择性海马窬0苀:,可能与特异性脑电活动有关,但与脑缺血无关。建立杏仁核注射诱导的大鼠边缘叶发作模型,检测/、、—鞍自隈拆锓⒆魅耸蠛B砩窬5谋泶铩5ゲ嘈尤屎四谧⑸銴导癫痫发作,后用安定终止发作,然后分别用旧ê蚦/、、—一蚦一谋泶铩=峁允荆发作终止时和出现裂解片段,时出现粜韵赴时达高峰。脑室内注射抑制剂狶杉跎賂阳性细胞,增加疫反应性增强,/和弥散于整个神经元内,—转移到神经阳性细胞及/、、—一蚦一鞍椎的移位、亚细胞分布改变和和的激活,—护神经元损伤的治疗靶点。采用脑立体定位注射技术,以深部电极持续记录脑电和激光多普勒血流测定仪记录狢,建立杏仁核注射诱导的大鼠边缘叶发作模型,发作后静脉注射/安定终止发作。实验动物分椋正常对照组;⒆髯椋猉组,杏仁核内注射前腹腔注射痥乱检测海马的分离,/、、—一蚦一赡懿斡复旦土学博士论文搐垂猉
结论尤屎俗⑸銴盏嫉谋咴狄恶拆锓⒆鞯贾伦⑸銴嗪B硌≡裥訡区神经死凋亡,可能与特异性脑电活动有关,但与脑缺血无关。踩撤⒆骺捎盏糂和—的分离。粒体通路机制,和为治疗癫痫发作致脑损伤的靶点,损伤起保护作用。关键词:红藻氨酸癫痫检测海马和的表达。结果显示,干预组可减少注射同侧海马疐阳性细胞、和裂解片断以及增加存活神经元。说明猉择拆锓⒆髦律窬K鹕擞斜;ぷ饔谩拆锓⒆魈蔚糲一蚦一募せ睿允夷谧⑸鋍一种剂猣可减少粜韵赴黾哟婊钌窬!拆锓⒆饔盏糞疍鞍状酉吡L逑蛳赴囊莆唬琗庖叻从π在神经元分布由核周弥散至整个细胞。甈—籖减少注射同侧海马鳷阳性细胞、和裂解片段以及增加存活神经元。综上所述,杏仁核注射诱导的癫痫发作导致选择性海马窬5亡,可能与特异性脑电活动有关,但与脑缺血无关。/、、、、—鞍撞斡肓笋拆锓⒆髦律窬5蛲龅南猉一ü种屏呀獾腸一蚦一择拆锓⒆髦履海马凋亡组,杏仁核内注射后腹腔注射痥猉7直用H旧ê蚦染色观察海马神经元存活和凋