文档介绍:上海交通大学
硕士学位论文
上海地区耐甲氧西林药金黄色葡萄球菌流行病学研究
姓名:张祎博
申请学位级别:硕士
专业:@
指导教师:倪语星
@
上海交通大学医学院级硕士研究生毕业论文
缩略语
缩写英文名中文名
MRSA Methicillin-resistant us 耐甲氧西林金黄色葡萄
aureus 球菌
PVL Panton-Valentine leukocidin 杀白细胞素
CA-munity-acquired MRSA 社区获得性 MRSA
HA-MRSA Hospital-acquired MRSA 医院获得性 MRSA
PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链反应
CLSI The Clinical and Laboratory Standards 美国临床实验室标准化
Institute 协会
MIC Minimal inhibitory concentration 最低抑菌浓度
SCCmec al Cassette Chromosome mec 葡萄球菌盒式染色体 mec
spa us protein A 葡萄球菌 A 蛋白
PFGE Pulse field gel electrophoresis 脉冲场凝胶电泳
MLST Multilocus sequence typeing 多序列位点分型法
E erythromycin 红霉素
D daptomycin 达托霉素
C ciprofloxacin 环丙沙星
L clindamycin 克林霉素
V ycin 万古霉素
O oxacillin 苯唑西林
T tetracycline 四环素
G gentamicin 庆大霉素
M sulphamethoxazole 磺胺甲恶唑
R Rifampicin 利福平
B Ceftobiprole Ceftobiprole
P penicilline 青霉素 G
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上海交通大学医学院级硕士研究生毕业论文
上海地区耐甲氧西林药金黄色葡萄球菌流行病学调查研究
中文摘要
研究背景
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是引起医院感染的最主要致病菌之一,
同时近年来在世界范围内社区获得性 MRSA(CA-MRSA)感染死亡的病例报道日渐增
多。到目前为止,国外研究发现,医院获得性 MRSA (HA-MRSA)和 CA-MRSA 不仅
流行范围不同,而且在生物学特性方面(如 SCCmec、毒素种类和耐药模式等)
也有显著差别,尤其是杀白细胞素(Panton-Valentine leukocidin,PVL),多
由 CA-MRSA 分泌,而 HA-MRSA 中少见[16]。目前国内对 MRSA 的研究缺乏系统性,
对于国内流行克隆的分类尚不完善,本实验利用耐药表型分析和 SCCmec、spa、
PFGE、MLST 基因分型方法,研究上海地区 MRSA 耐药性和流行特点,为进一步及
时诊断、治疗 MRSA 感染及爆发流行的有效预防和控制打下基础。
实验菌株和实验方法
1. 收集分离自上海交通大学医学院附属瑞金医院、上海交通大学附属上海市第
六人民医院、上海交通大学附属儿童医院、上海市肺科医院和瑞金医院闵行
分院的金黄色葡萄球菌共 154 株,用头孢西丁纸片扩散法和 mecA 基因 PCR
方法筛查 MRSA。同时采用琼脂稀释法进行 13 种抗菌药物的药敏试验,以
全面了解 MRSA 的耐药情况。
2. 使用多种引物用 PCR 方法进行 SCCmec 分型和 PVL 毒力因子检测。再根据临
床资料,用 PFGE 分型方法对 140 株 PVL 阴性(PVL-)MRSA 和 9 株 PVL 阳
性(PVL+)MRSA 进行同源性分析,了解上海地区 MRSA 的流行情况
3. 对 PVL 阴性 MRSA 的主要 40 株流行克隆株和 9 株 PVL 阳性 MRSA 进行 spa
分型,同时对 9 株 PVL 阳性 MRSA 进行 MLST 分型,以了解上海地区 MRSA
的流行情况并与世界主要流行菌株进行比较。
实验结果
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1. 140 株 PVL MRSA 对苯唑西林耐药的 MIC50 和 MIC90 均为 256µg/ml。其中 93
株同时对青霉素、苯唑西林、庆大霉素、磺胺甲唑恶、克林霉素、红霉素、
环丙沙星和四环素耐药的菌株,占 %,是主要的耐药模式。SCCmec 包
括 II 型、III 型和 IV 型,以 III 型为主。PFGE 分型方法显示 PVL-