文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
C/EBPε参与PI3Kγ基因表达调控的研究
姓名:蔡蓉
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:卢健
20050401
学位论文作者繇基薅/学位论文使用授权声明日期:芝翌。核浚簓学位论文独创性声明日期:.、。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确说明并表示谢意。本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。作者签名:导师签名
和赴脊鄄斓秸虻腜珊可显著提高与其相连报告基因的表达,而中文摘要本实验室在以往的实验中,通过生物信息学与生物化学的方法在人因最后一个内含子中鉴定发现一长约暮嘶式岷锨,:嘶式岷锨唤鍪侨旧矢呒督峁的组分,而且具有重要的生物学功能。利用转录因子结合位点分析软件点,其中包括核基质结合蛋白/约霸煅O赴匾斓转录因子疎珿,虸等。⒂敕化过程中发挥重要作用的转录调控因子,参与调控多种髓系细胞特异性基因的表达。丫亦主要表达于造血系细胞,与赴某墒臁⒎只⒓せ睿戎行粤细胞和巨噬细胞的移动关系密切,并参与细胞的呼吸爆发与炎症反应。在本研究中,首先根据衷煅O迪赴邪攵縍慕峁≡袢肆R单核白血病细胞作为过量表达研究的对象。通过在细胞内过量表达疎￡,发现疎诖俳赴⑸只饔玫耐保沟肞蛟谧B及翻译水平均发生了显著的上调改变,观察结果提示疎赡懿斡肓薖所基因的表达调控,并为进一步研究疎墓δ芗安斡隤研基因表达调控的机制提供实验依据。疎茿盏枷赴只讨兄苯幼饔玫陌谢颍鳤系虻幕浦两裆形吹玫讲鳌NQ橹訡/及丫表达的上调作用,,曜B家蜃硬斡隤基因转录表达调控的时间可能性。本实验室既往研究结果显示瞬时表达的情况下,在。,反向的饔貌幻飨浴2⑶艺騊在赴冢琍相连的报告基因的表达水平最高鞅。这与本研究中报告基因在细胞内对腜序列分析发现,在【内存在多个转录因子结合位述两种基因的表达,.蚖的结果均证实对疎的表达情况相类似。由于在瞬时表达的情况下,话悴⒉荒芴岣咭煸椿上痒摹二唾舛土学Ф痉智総格学专枋垦Ю猜踻
疎隤内增强子元件的体内结合活性两种模式,而间接上调因的范围,而且对早日阐明谢虻牡骺鼗埔彩怯兴砸娴摹的表达,反而有时会降低基因的表达:结合利用软件分析的结果,即在内存在多个造血细胞特异的反式因子结合位点,我们推测在锌赡艽嬖名,受其调控的下游基因具有显著的组织类型特异性。在本研究中发现,共转染了疎泶镌靥宓恼騊/ǜ婊虻谋泶锼浇辖鲎H颈ǜ婊蛞约共转染表达载体者提高了两倍,而与反向嗔谋ǜ嬖靥逦垂鄄序列相邻或共存的增强子调控基因表达的作用可能存在方向性,这是在今后工作中值得进一步探索的润题。通过生物信息学软件,在蛄械λ阉鞯揭桓鯟/易迩痹诘慕岷衔坏。实验结果证实内源性駼暝赨赴谀芡ü宋坏阌隤/⑸匾性结合,并且在舶黑盏糢赴只讨校岷匣钚杂兴銮浚锏最高,后有所下降。这一结果不仅为细胞内源性疎隤序列相互接触提供了有力的证据,而且表明疎隤的相互作用的增强存在一过性。结合上文的与检测诱导表达的结果,我们认为御限赡苁峭ü系鱑赴蠧/的表达水平,并且增强特异性双链寡核昔酸探针发生直接结合,并且经处理后的细胞结合能力似乎更强,并且这种结合作用能够被特异性探针所竞争。但是由于时间和技术总之,本研究在实验室既往工作的基础上,对珽￡通过内含子型核基质结合区锌赡艽嬖诘淖橹匾煨驮銮坑柙<斡隤基因转录表达调控的可能性进行了较为深入的探索。本研究不仅拓展了疎斡氲骺鼗关键词:疎缓嘶式岷锨籔;基因表达调控着组织特异性的增强子序列,并推测正向的饕O允驹銮孔拥淖饔谩疎蚱淠芄挥牖蚱舳拥腃区及多种病毒的增强子相结合而得到此现象,从而对上述推测作出迸一步验证。同时,本研究结果提示,与基因的表达水平。结果发现无论是未经处理的细胞,还是处理的细胞核抽提物在体外都能够与生物素标记的疎家族平台所限,未来得及用试验进行迸一步验证。上薛摹裢裂阑в敕ρФ緗磺士学最格文
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