文档介绍：T-SPOTTB与预防性抗结核治疗硕士研究生:李思颖导师: 主要内容 -SPOT即利用酶联免疫斑点技术(ELISPOT)通过检测结核分枝杆菌特异性抗原刺激后外周血单个核细胞释放的γ-干扰素来检测抗原特异性T淋巴细胞的应答反应,从而判断结核感染状态。每一个斑点代表一个分泌细胞因子的T细胞,记数斑点数量可以获得外周血中结核致敏的T细胞数量。 ,只存在于结核分枝杆菌群(包括人型、牛型和非洲型分枝杆菌)及其它几种致病性分枝杆菌(如堪萨斯分枝杆菌,Szulgai分枝杆菌,海分枝杆菌)中,是T细胞的靶抗原,能诱导皮肤迟发型超敏反应并刺激外周血单核细胞产生γ-干扰素。 -SPOT检测过程:收集1*10^6外周血单个核细胞,平均分为4份,*10^5,分别加入空白对照、抗原A(ESAT-6)、抗原B(CFP-10)、阳性对照孔中。然后使用ELISPOT法,并分别记录每个孔中斑点形成细胞数目(SFCs)。 ≤5SFCs时,只要(A-空白)或者(B-空白)≥6SFCs考虑为阳性,存在结核感染。当空白对照≥6SFCs时,要求A或B孔细胞数大于空白两倍才考虑阳性。 :部分化验单回报结果为A、B实验孔出现斑点形成细胞数目(SFCs)减去空白对照后乘以4,因此化验单上界值为6SFCs*4=24。只要A或者B值≥24则考虑存在结核感染,AB值之和大于500-600考虑活动性结核可能。 :表明样本中可能不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞有反应性:表明样本中存在针对结核杆菌特异的效应T细胞 活动性结核病:结核中毒症状,影像学检查支持结核病诊断,临床排除其他疾病结核感染状态:结核中毒症状,无影像学等临床检查证据,临床排除其他疾病,试验性抗结核治疗有效既往结核感染:无结核中毒症状,影像学显示病灶存在(钙化或陈旧性病灶),存在结核病史潜伏性结核感染:无结核中毒症状,无影像学等临床检查证据,根据发展为活动性结核病风险程度决定是否进行预防性抗结核治疗非结核分枝杆菌感染:4种环境分枝杆菌的感染(海、堪萨斯、苏尔加、戈登分枝杆菌)结核菌素试验TST所致T-SPOT假阳性:需同时检测T-SPOT和TST时,T-SPOT的血样最好在TST实验前或者实验后3天内采取 因感染阶段不同引起的假阴性结果,如标本是在细胞免疫发生前获取的少数免疫系统功能不全的情况,多见于严重免疫缺陷的病人以及其它免疫学、实验非正常操作的差异高龄、超重、检测前病程超过6个月肺结核患者出现T-。假阴性常见于: