文档介绍：复旦大学
博士学位论文
干扰素γ诱导蛋白10基因与肿瘤抗原修饰树突状细胞抗前列腺
癌实验研究
姓名:李博
申请学位级别:博士
专业:外科学
指导教师:唐孝达
20040420
干扰素丫诱导蛋白基因与肿瘤抗原修饰树突状细胞抗前列腺癌实验研究中文摘要方法:结果:模提取小鼠脾脏总孀B级嗑勖噶捶从┰鲂∈驣因并加上信号肽基因序列后,,构建./.表达载体并转化、抽提和纯化。分离骨髓前体细胞,在细胞因子—虸采用形态学饩怠⒌缇、免疫细胞化学约懊庖呱镅等菇ǜ扇潘豗诱导蛋白琁真核表达质粒痯⒋罅恐票浮⒋有∈蠊撬枨疤逑赴蟹掷搿⑴嘌屠┰鍪魍蛔聪赴的方法:研究发育、分化和成熟过程中形态、结构以及免疫生物学特性的改变;探讨影响增殖、分化的有关因素。玆前列腺癌细胞的裂解产物和一基因共同修饰,构建前列腺癌瘤苗疞狣;体内、外实验检测该瘤苗抗前列腺癌免疫治疗作用及免疫保护作用。联合作用下,经手法筛选,大量制各骨髓方法研究的生物免疫学特性。┫赴牧呀獠锔涸谼螅通过脂质体转染法将,基因导入,制备./—前列腺癌瘤苗;.的表达,测定转染上清对赴的趋化指数,检测瘤苗刺激赴脑鲋骋约坝盏继匾煨訡的杀伤作用。┠P停鄄旄昧雒缍院闪鲂∈蟮拿庖咧瘟谱饔茫涸は扔用瘤苗接种小鼠后,∈螅鄄炝雒缬盏嫉拿庖弑;ぷ饔茫椒ḿ觳饨又諨雒缧∈驝的一虸表达水平。菇ǖ腎痯表达质粒,经酶切电泳和⒎聪虿庑蚣ǎ证实重组质粒构建正确,。,体外培养旌螅纱用,.,
结论:旌狭馨拖赴从ο允荆琁疞瓺雒绱碳ね蛐托∈笃⒃郥细胞裂解产物的庖咝∈螅淦⒃,—/.治疗组仍有%的小鼠存活,⑾郑璉疞瓺雒缰瘟频男∈螅琢鲎橹植炕邓烂庖弑;な笛榉⑾,小鼠生存期延长,,但明显弱于一/—,免疫小鼠只有%无肿瘤生长,差异菇ǖ腎痯表达质粒正确。只小鼠的骨髓前体细胞中获得个。形态学观察可见,培养早期的突起少而短,胞内有许多囊泡,细胞器少;细胞表面低表达分子和肿樱碳细胞增殖能力极弱,但吞噬能力强;培养焓保胞呈现典型的形态,表面伸出许多树枝样突起,,吞噬功能减弱,ü鼶脂质体转染法可以成功的将一基因导入,构建./.前列腺癌瘤苗;经和觳庵な底H綝腎偷鞍妆达明显增强,其细胞上清对馨拖赴邢灾骰饔谩增殖能力明显提高。四氮唑蓝乖ḿ觳庀允荆酶涸豏细胞免疫组小鼠,,,生存期延长;应用一显,在瘤体周围和瘤体内有大量炎细胞浸润,.治疗组也可见较明显的炎细胞浸润,但少于./—组。一/.免疫的小鼠仍有%无肿瘤生长;.,经./—免疫的小鼠,其腎和表达水平明显升高,与庖咝∈笙啾龋钜煊邢灾砸庖∈蠊撬璧ジ龊讼赴谙赴蜃覩狢和一盏枷拢ü址ㄉ秆。—椤疞狣中文摘要
关键词:树突状细胞;前列腺癌:干扰素盏嫉鞍恢琢鱿赴呀獠扩增获得大量功能性。.,可增加的得率,增强的免疫功能。ü侍遄H痉ń獻痯导入,,,能够明显刺激赴脑鲋常盏嫉奶匦阈置贗和一/能力增强,┟庖咧瘟谱饔茫闪鲂鼠肿瘤生长减慢,生存期延长;肿瘤组织出现坏死和炎细胞浸润。甀疞狣雒缇哂忻庖弑;ぷ饔茫又至雒绲男∈竽芄坏挚筊肿瘤细胞的攻击。免疫治疗;免疫保护中文摘要
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刖虽然在体内数量极微稣糚膌%以下ǚ植脊惴骸S刖奘上赴细胞等相比,不仅可以极其高效地摄取、处理、加工和提呈抗原,而且能直细胞识别和杀伤肿瘤细胞,也可以激发免疫记忆保护,在宿主再次受到肿瘤细胞攻击时发挥作用【】。乱蛭狣诿庖哂Υ鹬械木僮闱嶂氐匚唬蛊涑晌C庖学领域的一个研究热点,尤其是抗癌瘤苗的研究和应用倍受人们的关注。起源于造血干细胞,可分为髓系来源和淋巴系来源两大类。目前对髓系研究较多,髓系的分化分为鼋锥危呵疤褰锥巍⑽闯墒炱凇⑶ㄒ破诤状态