文档介绍：幺冶第二压斜夕望分类号密级培养单位指导教师研究生姓名论文提交日期编号学科、专业靳华医院施诚仁教授儿科掌饪鲍南
咪—毫作者签名:丝日期;旰躺学位论文独创性声明学位论文使用授权声明、/本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确说明并表示谢意。本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的屯子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名:导师签名:日期:/
中文详细摘要神经干细胞移植治疗鼠类脊髓栓系综合征的实验研究目的脊髓栓系综合征为先天性或后天性原因造成脊髓异常牵拉,导致神经功能障碍。患儿往往留有大小便失禁,二下肢瘫等严重后遗症,是我国伤残儿童重要病因之一,给患儿生活、心理及家庭带来很大影响,更影响我国优生优育国策和民族素质。该病在我均每年就有余例。目前主要依靠手术并辅以药物治疗,但许多病例治疗效果仍然不甚满意,原因是某些类型脊髓栓系手术难以完全松解,或手术后再栓系,更主要由于治疗时部分神经细胞已经死亡,无法修复。因而,试图寻找一个新的有效的治疗方法,如通过新的细胞移植到病变脊髓内来替代缺失的神经细胞,促进神经功能恢复,具有十分重要的意义。本实验目的谱骼嗉顾杷ㄏ底酆险的大鼠模型,为神经干细胞移植治疗脊髓栓系提供实验模型;优咛ゴ笫脊髓提取神经干细胞进行分离和培养,并证实其具有增殖及分化成神经细胞的潜能;ナ蟮纳窬上赴浦驳嚼嗉顾杷ㄏ底酆险髯酆险鞔笫蟮牟”浼髓中,观察是否有治疗效果。方法锬P椭谱鳎撼赡甏菩許笫螅手术暴露脊髓及终丝,将终丝悬吊在隧缆胂拢辜顾柙克砝码的拉力下被牵拉下移,引起神经损害,然后用缝针将下移的脊髓固定在椎管旁组织上,造成一永久性类脊髓栓综合征系;窬上赴掷肱嘌捍釉大鼠胚胎脊髓中分离、培养神经干细胞并诱导其分化,通过免疫组化技术研究其特性;窬上赴浦玻捍笫罄嗉顾杷ㄏ底酆险髂P椭谱天后,将未分化的神经干细胞注入病变脊髓内,观察大鼠的运动功能,潞蟠λ来笫螅芯恳植后的干细胞在体内存活、迁移及分化情况。结果竦昧硕笾被镜类脊髓栓系综合征鼠模型,病理显示病变脊髓神经元数量明显减少,神经功能受损;优咛ゴ笫蠹顾枘诨竦昧舜罅课捶只⒊市∩さ纳窬上赴颍传数代后仍有干细胞特性,在血清诱导下,可分化为神经元及神经胶质细胞。嗉顾杷ㄏ底酆险鞔笫笠浦哺上赴笤硕δ芨纳疲窬J吭龆啵
显著好于未移植组。免疫组化方法证实移植后的干细胞在体内可以存活、迁移、分化成神经细胞。结论罄嗉顾杷ㄏ底酆险髂P腿菀字谱鳎婊盥矢撸存活期长,并能耐受再次手术,为探索脊髓栓系征的治疗提供了一个比较合适的动物模型。臼笛橹な蹬咛ゴ笫蠹顾枘诖嬖谏窬上赴芙蟹掷搿培养和多次传代,并分化成神经元及神经胶质细胞,为神经干细胞的基础研究及临床应用奠定一定基础。笫笈咛ド窬上赴迥凇⑻逋饩哂卸嘞蚍化潜能,移植神经干细胞细胞移植到病变脊髓内可替代缺失的神经细胞,促进神经功能恢复,是治疗脊髓栓系综合征的一种新的途径,为留有大小便失禁、二下肢瘫等严重后遗症患儿的神经功能恢复带来希望。丶省可窬上赴赴嘌浦布顾杷ㄏ底酆险魇
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胚胎大鼠脊髓源性神经于细胞的培养分化及其意义第一部分自世纪年代初起,人们对神经干细胞认识逐步深入,并成为神经生物学领域的研究热点。神经干细胞是指存在于神经系统中能够增殖分化成神经元、胶质细胞和少突胶质细胞的特定原始神经细胞。它具有两个基本属性:一是具有高度的自我更新能力,能够重复进行有丝分裂,产生大量的子代细胞;二是在一定条件下可以分化成神经细胞和神经胶质细胞。神经干细胞具有高度增殖和自我更新能力,在一定条件下能不断进行有丝分裂。通过对称性及非对称性分裂,神经干细胞增殖、互相聚集成神经球,神经球根据培养的时间及大小可含有神经于细胞、正在分化的神经前体细胞、凋亡细胞甚至已分化的神经元和胶质细胞。经过机械分离,已分化的和正在分化的细胞死亡,而神经干细胞继续增殖,生长出许多子代的神经球“嘲报道,神经干细胞可在体外持续传代达三年以上。分裂后的子代干细胞具有与母代干细胞完全相同的生物学特性。神经干细胞分化后可形成神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞,其分化与局部微环境密切相关。目前诱导分化神经干细胞主要通过生长因子诱导、基因调控及信号传导通路调节等。