文档介绍：April 9, 2002
常见常见HPLCHPLC故障排除故障排除
常见HPLC问题的故障排除
重点强调:
化学品样品
色谱柱
系统设置
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概要
第一部分

故障排除策略综述

机械及化学因素对性能的影响

仪器谱带展宽

系统检测及优化

色谱柱的性能

塔板数,死体积

色谱峰形问题
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概要
第二部分

保留时间重现性

温度

有机相比例

pH

离子对

疏水塌陷

方法开发建议

额外的色谱峰(鬼峰)

基线噪音
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液相色谱问题的可能根源

流动相
泵

进样器
保护柱

在线过滤器
连接管线及接头

色谱柱

积分仪/记录仪/软件

检测器

样品
逻辑判断—
将会节省解决问题的时间
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故障排除的策略
问题
简化问题--
评估对试验室效率的影响--
观察色谱图--
尝试分类问题
最先对最容易的部分进行故障排除
化学问题机械问题

泵

色谱柱
进样器

保护柱
检测器

流动相
数据采集

样品/样品瓶问题
谱带展宽/连接

色谱柱
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样品瓶
为什么得到变形的色谱峰

所有色谱峰都变形(变坏)?

变形谱带–
机械问题化学问题
x 进样器- 溶解样品的溶剂太强
x 色谱柱有死体积
x 连接有问题
_
检测池
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所有色谱峰都变坏(变形) —机械问题
相似的变化
Voids - high back pressure,
Waters Corp. © 2002distorted and/or double peaks
所有色谱峰都变坏(变形) —化学问题
–溶解样品的溶剂不正确—洗脱强度比流动相强
(Too较强溶剂 strong)
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为什么色谱图中某个或一些色谱峰变形?

为什么得到一个或一些变形的色谱峰?

变形谱带—化学问题
x 某一个样品组分与颗粒表面发生阳离子交换
检测池
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