液相色谱仪色谱柱的使用和保养(PPT课件).ppt

文档介绍：液相色谱实用技术
色谱柱的使用及保养
良好的色谱实验****惯
拿到一根新色谱柱时,先测柱效
保留在新色谱柱上测得的色谱图,并记录条件
定期检测柱效
定期检测仪器的谱带展宽
色谱柱的使用及操作
流动相的转换
流速(压力)的变化幅度
温度的变化幅度
专用色谱柱∶样品及溶剂的要求
色谱柱的保养(一)
样品方面
除去微粒及杂质
了解样品在流动相中的溶解度
如样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,防止其在流动相中析出
了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用
色谱柱的保养(二)
流动相方面
除去微粒
纯度的要求
超纯水,梯度实验时水中有机杂质含量要低
缓冲液的pH值,在填料的允许范围内
缓冲液(盐)的浓度
溶剂:色谱纯,
溶剂中的杂质含量
流动相对样品的溶解度
有机溶剂或水的比例
在线的保护装置
给色谱柱提供物理的保护
除去样品及流动相中的颗粒
给色谱柱提供化学的保护
防止分析柱被化学污染
装置
在线过滤器
自装填料保护柱
预装保护柱
在线过滤器
In-Line Filter
防止颗粒在色谱柱头累积
优点:基本不影响柱效
在需要高柱效的分析时中常用(如:氨基酸分析)
可更换的消耗品
更换滤芯,
更换垫圈,
保护柱
可避免化学污染。多数保护柱影响到整个色谱柱的柱效,特别是在用微柱时
保护柱的种类
普通自装填料的保护柱
用户自装填料
影响柱效同装填技术有关,柱效降低较大
色谱柱的清洗
对所做的样品要有充分的了解
用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗
硅胶柱的一般方法
先用甲醇洗去极性杂质
用干燥的二***甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
键合相柱(烷基)的一般方法
20倍柱体积的:甲醇-***仿-甲醇-水依次冲洗
色谱柱的存放
存放前的处理
除去杂质、盐
合适的存放溶剂
避免色谱柱床的干枯
避免机械震动
防止细菌生长