文档介绍：三氧化二砷抑制小鼠缺氧性视网膜病变的实验研究
中文摘要
mg/kg和5mg/kg两种剂量三氧化二砷(Arsenic trionic, As203)对新生小鼠缺氧性视网膜病变模型(Hypoxide induced proliferative retinopathy,0IR))EC(Endothelial cells,EC)
和新生血管(Neovasculars, NV)增殖的影响,从形态学、细胞凋亡及
血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF) 和血小板源性生长因子(P1atelate derived growth factor,PDGF)的改变,探讨As20 3对视网膜新生血管退化的作用和可能机制。
方法将新生7天的C57BL/6J小鼠分为正常组和模型组。正常组在正常室内空气环境标准饲养到出生后17d。模型组在出生后 7~12d置于高氧环境,1 2~17d恢复正常室内空气环境,制作OIR 模型。出生后1 7d模型组鼠作为对照组。其余出生后17d时分不注药、 mg/kg和5mg/kg As203组。于注射后3、6、9、 1 2d(即出生后20、23、26、29d)分别取眼球制成石蜡切片进行 ,400倍光镜下记数视网膜NFL和突出于玻璃体腔内的EC和血管腔;2)TUNEL法检测EC凋亡,图象分析NFL(Nerve fiber layer,NFL)和INL(Inner nuclear layer,INL) 凋亡染色阳性表达率的变化:3) mg/kg组在注射后3、6、
9、12d的眼球光镜和电镜下EC和NV的凋亡、退化及神经节细胞和神经胶质细胞、成纤维细胞的形态改变;4)免疫组化检测VEGF 和PDGF的表达变化,图象分析NFL和NFL内的阳性率变化。
结果1)模型组分别在注射和0,5 mg/kg As203后6d和5mg/kg 后3d,NFL和突出于玻璃体腔的EC、NV数量均降到正常组水平, 并持续到注射后12d;且注射后视网膜各层并未见明显的组织损害;2)模型组NFL内EC凋亡染色明显低于正常组;腹腔注射0,5mg/kg
。盘鸯j珏三羧糍v二吒:亭,晦曩?oF囊i二j静:艺和5mg/kg的As20 3后EC凋亡明显升高,并分别于注射后3d、6d
降到正常状态,其中注射后3d在NFL和突出于玻璃体腔的NV上均可见EC凋亡染色; INL和视网膜外层结构并未见明显的凋亡染色改变;3)模型组增生的EC和NV突破内界膜向玻璃体腔内生长,增殖的EC代谢旺盛,NV有或无基底膜,伴有管壁和神经节细胞的破坏;注药后3d,视网膜血管的基底膜增厚改善,NV内已发现凋亡和变性的EC和退化呈网格状的NV,EC的改变主要是线粒体的空泡变性,6d后己鲜见凋亡的EC和NV,视网膜结构排列整齐。未见大血管的EC和周细胞以及神经胶质细胞和成纤维细胞的改变;4)VEGF和PDGF在正常组弱表达于视网膜NFL、 INL和NV的EC。模型组呈强阳性表达于上述部位,尤其以NV 和EC表达明显:注射后3d VEGF在以上2层内的表达已霸:始逐渐降低,至1 2d接近正常组水平;PDGF的表达在注射后3、6d表现出增高的趋势,随着增殖的EC凋亡和NV退化,在注射后9、 12d逐渐降低劳恢复到正常水平。
结论小剂量腹腔注射A s 203可以通过促进NV的EC凋亡、改善血管基底膜,从而改善视网膜的血管结构,抑制VEGF及提高PDGF在视网膜上的表达,抑制OIR鼠的视网膜增殖性病变, 对正常视网膜的组织结构无损害。提示小剂量腹腔注射As203有望用于治疗晚期的PDR和PVR。这还有待于进一步研究。
【关键词] As20 3; 缺氧性视网膜病变; 新生血管;血管EC生
长因子;血小板源性生长因予
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Experimental Studies on Asz03 in Inhibiting of
Murine Oxidative Induced Retinopathy
Abstraet
0bject To investigate if arsenic trionic(A s 203)can inhibit the hypoxide induced proliferative retinopathy(OIR)in mouse model an the probably mechanisms,especially what happened to the neovasculars(NV) and vascular endothelia]cell s(EC)after the injection.