文档介绍：植物基因组DNA的提取琼脂糖凝胶电泳检测脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)与蛋白质结合在一起以核蛋白(DNP)的形式存在。在制备核酸时通常破坏细胞壁及细胞膜来使核蛋白释放出来。植物总DNA包括细胞核DNA和细胞核外DNA,前者存在于细胞核内,后者存在于细胞质中有半自主性复制活性的细胞器内,例如线粒体DNA(mtDNA)和叶绿体DNA(ctDNA)。核酸的存在形式DNA为白色类似石棉样的纤维状物,RNA的纯品呈白色粉末或结晶。核酸和核苷酸大都呈酸味。DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、***仿等有机溶剂,它们的钠盐比游离酸易溶于水。在酸性溶液中,核酸易水解,中性或弱碱性溶液中较稳定。核酸的理化性质细胞破碎抽提去蛋白质沉淀核酸操作步骤①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;②化学试剂法:用SDS处理细胞;③酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶,破坏细胞壁。细胞破碎SDS法SDS是有效的阴离子去垢剂,细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,SDS能够破坏这种价键。CTAB法CTAB是一种阳离子去垢剂,它可以溶解膜与脂膜,使细胞中的DNA-蛋白质复合物释放出来,并使蛋白质变性,使DNA与蛋白质分离。DNA提取蛋白质常用苯酚:***仿:异戊醇(25:24:1)或***仿:异戊醇(24:1)抽提。RNA常选用RNase消化,或是用LiCl来消除大分子的RNA。酚类物质提取液中加少量巯基乙醇,选取幼嫩的材料。多糖提取液中加1%PVP。DNA纯化(去杂质)实验材料新鲜蔬菜叶片(去叶脉)试剂2×CTAB抽提液TE缓冲液(pH=)***仿:异戊醇(24:1)材料与试剂①离心机②水浴锅③研钵④,加1/3药匙石英砂和4mL2倍的CTAB提取液,迅速研磨。,置于65℃水浴中保温20min,其间颠倒混匀2-3次。,取上清液700μL转到另一离心管中。加入等体积***仿:异戊醇(24:1)混合液,充分颠倒混匀。12000r/min,离心5min。,加600µL异丙醇。颠倒混匀,可见DNA絮状沉淀。,离心1min,倒掉上清液,将离心管倒置干燥。将沉淀回溶于20µLTE缓冲液待测。操作步骤