文档介绍：常州工程职业技术学院
《仪器分析》教案
紫外­可见分光光度法
单元技能训练 3­分光光度法测铁条件实验
学生进实验室后,先开机、预热。
复习提问
工作曲线法测铁实验中的各项实验条件是什么?各项分析条件选择的依据是什么?
课程引入
上次实验中,工作波长选择 510nm 的依据是什么?为什么只需要加入 的
邻二氮菲溶液,以及 5 mL 的醋酸钠溶液?
显色剂用量
配制一系列被测元素浓度相同不同显色剂用量的溶液,分别测其吸光度,作 A-CR
曲线,找出曲线平台部分,选择一合适用量即可。
溶液酸度
选择合适的酸度,可以在不同 pH 值缓冲溶液中,加入等量的被测离子和显色剂,
测其吸光度,作 A-pH 曲线,由曲线上选择合适的 pH 范围。
稳定性、干扰消除绘制 A 对 t 的曲线,选择吸光度平坦的部分确定最佳的显色时间。
干扰的消除:酸度、氧化剂、掩蔽剂、入射波长、参比溶液
显色温度、溶剂选择
大多数显色反应是在常温下进行的,有些反应必须在较高温度下。绘制工作曲线和
进行样品测定时应该使溶液温度保持一致。有机溶剂常常可以降低有色物质的离解度,
增加有色物质的溶解,从而提高了测定的灵敏度。
入射光波长一般情况下,应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。干扰物质存
在时,依据“吸收最大,干扰最小”。
选择方法:绘制光的吸收曲线确定最佳波长。
参比溶液、吸光度范围
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参比溶液的选择:溶剂参比、试剂参比、试液参比、褪色参比、吸光度范围。
光的吸收曲线的绘制
取两个 50mL 干净比色管;移取  mL­ 1 铁标准溶液 于其中一个 50mL 
容量瓶中,然后在两比色管中各加入 1mL100 g L­ 1 盐酸羟胺溶液,摇匀。放置 2min 后,
各加入  g·L ­1 邻二氮菲溶液,5mL 醋酸钠(  ­1)溶液,用蒸馏水稀至刻 
线摇匀。用 2cm 吸收池,以试剂空白为参比,在 440~540nm 间,每隔 10nm 测量一次
吸光度。在峰值附近每间隔 5nm 测量一次。以波长为横坐标,吸光度为纵坐标确定最大
吸收波长λmax。
显色剂用量的选择实验
取 6 只洁净的 50mL 容量瓶,各加入 ·mL  ­1 铁标准溶液 ,1 mL100g·L ­ 1 
盐酸羟胺溶液,摇匀。分别加入 0、、、、、 g·L ­1 邻二氮菲,5mL 
醋酸钠溶液,用蒸馏水稀至标线,摇匀。用 2cm 吸收池,以试剂空白溶液为参比溶液,
在选定的波长下测定吸光度。
显色剂用量的选择方法是方法是:固定被测组分浓度和其他条件,然后加入不同量
的显色剂,分别测定吸光度  A  值,绘制吸光度(A)­显色剂浓度(CR)曲线。选择曲
线中 A­CR 的平坦部分。
显色条件中溶液酸度的选择
溶液酸度对测定过程的影响体现在一、配合物的配比产生变化;二、降低配合物的
稳定性;三、显色剂的颜色会产生变化;四是金属离子会水解。
溶液酸度的选择方法是:固定待测组分及显色剂浓度,改变溶液 pH 值,制得数个