文档介绍：
中华人民共和国农业行业标准
NY1537-2002
猪放线杆菌胸膜肺炎诊断技术
Diagnostitechniquefoactinobacllupleurop neum o m a
2002一08一27发布 2002一12一01实施
中华人民共和国农业部发布
303
xY/537- 2002
前言
猪放线杆菌胸膜肺炎(简称 APP)又称猪接触性传染性胸膜肺炎(porcincontagioupleuropneu-
moni,是猪的一种呼吸系统重要传染病。世界各国均有发生。本病主要引起猪的一种伴有胸膜炎的出
血性坏死性肺炎,多呈最急性或急性病程而迅速致死,可发生于任何年龄的猪只。尤其在集约化养猪场
一旦发生会造成重大经济损失。
国外用于本病的血清学诊断方法有凝集反应、琼脂扩散、间接血凝、补体结合((CF)以及酶联免疫吸
附试验(ELISA)等。而最常应用的血清学诊断方法是CF和ELISA试验。细菌的鉴定除用常规方法外,
也有用聚合酶链反应(PCR)方法诊断。型的鉴定常规方法有琼脂扩散和间接血凝等试验方法,近来亦有
应用核糖核酸分型的试验报道。
本标准的附录 A,附录B、附录C、附录 D、附录 E,附录F、附录G,附录 H 均为规范性附录。
本标准由农业部畜牧兽医局提出。
本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:农业部动物检疫所。
本标准主要起草人:朱士盛、杜文金、徐瑞、王新。
NY/537-2002
猪放线杆菌胸膜肺炎诊断技术
1 范围
本标准规定了猪放线杆菌胸膜肺炎的诊断技术。
本标准酶联免疫吸附试验用于筛选试验,包括产地检疫、流行病学调查和无本病健康猪群的建立
补体结合试验适用于口岸进口猪检疫。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的
修改单(不包括勘误的内容),鼓励根据本标准达成协议的各方研究是
否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
G478928-1994食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
3 病原学检查

:按G478928- 。
:-,。
:按G478928- 。
:制备方法见附录A,
((PPLO)琼脂:制备方法见附录 A,

。
:按G478928- 。
:按G478928- ,,pH
调至 ,另外,%加人糖的同时,%加人辅酶 A后,分装于有倒置小管的试管内,
689kPa(1150C蒸汽)灭菌 1min,
、金黄色葡萄球菌。

:用棉拭子伸人鼻腔采集分泌物,放人无菌试管中立即送往实验室供分离。
:无菌采集具有典型病变的肺气管、肺门淋巴结、鼻腔分泌物,在最急性感染死亡
的小猪,除采集上述病料外,还可取肝、脾病料。
:采集的样品,应在'C条件下 2h内送到实验室。
病原分离
将样品按常规分离要求直接接种到血琼脂()表面,再用鸡表皮葡萄球菌作交叉划线,于
'C含500^'10%二氧化碳(COQ)下培养。继代培养用巧克力琼脂(见第 )和PPLO 琼脂(见第
)。
NY/537一2002
病原鉴定
培养形态及染色特性
于血琼脂平板培养 2h--4h,胸膜肺炎放线杆菌(APP)为露珠样的小菌落,ft 径 nom-
mm ,
R溶血带,靠近鸡表皮葡萄球菌菌苔的菌落较大,随着与葡萄球菌生长线的距
离增加而变小或不生长,即所谓“卫星现象”。
,应为革兰氏阴性小球杆菌,两极着色继代培养中呈明显多形态
幼龄培养物中偶有成丝状。
:
a)染色镜检为革兰氏阴性杆菌或多形态;