文档介绍：DNA复制云南大学基因工程基本原理基因复制在细胞生理中的重要作用;基因工程的其中一个重要目的,即是使外源基因在宿主细胞中稳定而大量地增殖;基因工程的主体战略思想就是要使外源基因获得高效稳定的表达。为达到此目,其中一种重要的措施:利用载体DNA在受体细胞中独立于染色体DNA而自主复制的特性,将外源基因与载体分子重组,通过载体的扩增提高外源基因在宿主细胞中的剂量,借此提高宏观表达水平。云南大学AmproriMCSLacpromoterlacZ’pUC18(3kb)云南大学DNA复制的研究发展1953年,Watson和Crick在其Nature发表的论文中宣布发现了DNA的双螺旋结构,同时作出了分子生物学历史上最有名的声明:我们已经注意到了,我们假设的特异性的配对方式提示了遗传物质可能的复制机制。DNA复制研究中存在的难题:DNA复制中是否按双螺旋结构预示的碱基配对方式进行;1958年MattenMeselson和FranklinStahl利用实验在大肠杆菌中得以证实;但事实上这个问题直至20世纪80年代才真正解决。1958年后,对复制过程的研究。基因组复制在细胞周期中的调节,已成为近些年研究的重要领域。云南大学DNA复制的研究发展(二)DNA拓扑异构酶DNAtopoisomerase:通过切断并连接DNA双链中的一股或双股,改变DNA分子拓扑构象,避免DNA分子打结、缠绕、连环,在复制的全程中都起作用。类型:拓扑异构酶I和拓扑异构酶II。拓扑异构酶I能切断DNA双链中一股并再连接断端,反应不需ATP供能;拓扑异构酶II能使DNA双链同时发生断裂和再连接,需ATP供能。-conservative,, Activity DurationG1 Growthandincreaseincellsize 10hrS DNAsynthesis 8hrG2 Post-DNAsynthesis 5hrM Mitosis 1hr云南大学DNA复制的概念InterphaseisdividedintotheG1,S,(M).,:包括DNA复制起始位点的识别;复制延伸:涉及在复制叉处发生的一系列过程,即母代多聚核苷酸被复制复制终止:母代分子复制完成时云南大学