文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
人结肠癌相关基因表达及甲基化调控
姓名:陆娟
申请学位级别:硕士
专业:消化内科学
指导教师:房静远

小时和小时,在不同的时间点提取其渊蚏,以—觳鈖,鏊健人结肠癌相关基因表达及甲基化调控摘要目的:结肠癌的发生同其它肿瘤一样,有癌基因的过度表达和,或抑癌基因的失活而在基因袭达调控中,谆谥琢龅姆⑸头⒄怪邪缪葑偶渲匾5慕巧ǎ冀雾常蓬逶遥影响痞蓥戮帮蓑】瘩簇因静表达以及基因缍翡稳定魏丽参与蒡孛瘗载发生和发展的。,遴~:,萋予含、%温凌翡。囱信嘌鴈首先震去孥基化裁荆珼氮脱氧胞蛰’‘分别以,牟煌ǘ雀稍∈焙小时,,毅捡溺貔蠢唏粗úぼ惨┟赜柙な欠窕岵甾ǘ燃。然嚣分别以转蚻的不同浓度的干预这两种细胞况。而对于结肠瘸中多个基因表达的甲基化调控情况知之甚少。在人结肠癌縡,琒..蚦等多种基因韵的液达情』究范铺妒颗饰宦畚
我们的研究表明—干预后,弧位蚱舳忧ゼ谆测删基因启动子区甲基化的情况。设计引物中无塑账帷酸氢钠修饰和测序的方法检测删基因显示所有的非坏愕陌奏ぞ细胞周期的阻滞:尽管猟稍ず笠鹆藀』病盎虮泶锏脑銮浚况;同时以流式细胞仪分析一蚐南赴芷凇N<觳庖┪锔稍猟稍ず螅琾蟆基因启动子区的械陌奏ぷ1涑闪诵叵汆奏ぁ粕矩婊虻南喙匦浴產荒苡盏糃和细胞浮八交虻募谆谋淝榭觯颐遣捎醚橇蛩崆饽菩奘魏筒庑虻姆椒ḿ亚硫酸氢钠修饰将非甲基化的胞嘧啶残基转变为尿嘧啶,已经甲基化的胞嘧啶不变。心蜞奏ひ孕叵汆奏さ男问奖焕┰龆丫谆陌奏げ槐洹Q橇细胞系中大多数的等位基因的某些坏闶羌谆摹T谟眦训基因表达的恢复:甦稍で埃珻和两种结肠癌细胞系中均有较弱的删谋泶铮—提高虻转录水平:慕峁允玖肆街窒赴旮稍で癆基因的表达水平较低。用稍∈焙罂傻贾翧基因的累积,使水平在稍∈焙蟊3衷诮细叩乃健不能诱导一但是却并不引起细胞周期的阻滞,而且在两种细胞中均末发现细胞周期与两种结肠癌细胞系中过表达,但是我们目前的研究显示用猟稍ず罅街只虻谋泶镂廾飨愿谋洹6遥珼甲基化不能调结果:转变成了胸腺嘧啶。本实验结果显示未处理组一蚐街纸岢Π疞而非较低浓度的產稍小时或小时后,其删㈨的表达增强。、和猰等多种基因的表达。尽管和猰已被
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各种基因的启动子区和包括第一外显子缓珻岛,其甲基化则直狢和一部分处于临床试验阶段,另一部分处于淮睬胺⒄菇锥巍目前的问题是,上述降低甲基化的制剂可通过抑制抑癌基因的甲基化而使其表达关系到肿瘤分子治疗的关键,而恰恰尚无学者研究。本课题试从体外研究的角度因和癌基因的功能,以期为结肠癌的基因和分子治疗提供新的思路和理论基础。过影响癌相关基因的表达和基因组的稳定性而在肿瘤等疾病的发生和发展中起胞低,但是伴有某些特定杭谆降脑龈摺R职┗虻母叨裙惴杭谆胞苷.’.—。复活,那么其是否可以由同样机制致使癌基因过表达而使细胞恶性程度加重来观察纠正谆陕铱煞窕峄指唇岢Π〤琒赴抵幸职┗谆怯蒁甲基化转移酶的囊恢痔烊恍奘畏绞剑诓溉槎铮渲饕2斡牖虻谋泶锏骺。甲基化是表型遗传修饰闹饕D谌荩湮陕液鸵斐M接抑制该基因的表达。近年来,人们发现肿瘤细胞的总基因组甲基化水平比正常细使⑸B家种疲泶锸Щ畈斡肓酥琢龅姆⑸0┗蚝鸵职┗虻募谆与肿瘤的发生和发展之间的关系已成为肿瘤研究的一个热点。低甲基化带日珼催化重要作用。爵上海第二医秘大学硕士学位论文
人结肠癌细胞癌相关基因的表达和M蜒醢盏母稍第一部分材料和方法材料分旨在通过以不同浓度和时间的M蜒醢崭稍づ嘌娜私岢Π┫赴辏鄄结肠癌的发生同