文档介绍：分离机理及色谱柱
液相色谱的分离机理
正相
反相
体积排除
离子交换
其他
不同的分离模式是不同的机理
吸附色谱的分离机理
随着样品在固定相上的吸附能力由大到小
在色谱柱上的保留由长到短
吸附色谱概述
分离基于样品的极性差异。
洗脱次序∶一般为正相,即:极性低的先被洗脱
常用的流动相∶
非极性有机溶剂,如己烷
常用固定相∶
硅胶、氧化铝。
分配色谱的分离机理
分配色谱概述
反相色谱的主要类型,基于分子的极性分离
洗脱次序:一般为反相,即极性高的先被洗脱
常用的流动相:
有机溶剂如甲醇、乙腈,水
应用添加剂,成为离子对、离子抑制方法
常用固定相:
碳十八、碳八、胺基等基团
反相色谱固定相多为键合相
键合相色谱柱
以硅胶为基质,通过化学键合方式把碳十八、碳八、胺基等基团联在基质上,作为固定相。
优点∶
固定相稳定,不易流失
应用广泛,可使用多种溶剂
消除硅羟基的不良影响
缺点∶
pH值不能小于3
同样填料,各种牌号色谱柱不尽相同
体积排除色谱的分离机理
凝胶色谱概述
分离基于分子在溶液中的体积大小
洗脱次序:大分子先被洗脱
流动相不参与分离,只起溶剂作用
分离效率低
色谱行为容易预测
离子交换树脂的分离机理