文档介绍：北京师范大学珠海分校
本科生毕业论文
论文题目:急性髓系白血病PML/RARA
融合基因芯片检测方法的研究
学院工程技术学院
专业生物技术专业
学号
学生姓名
指导教师姓名
指导教师职称副教授
指导教师单位北师大珠海分校工程技术学院
200 年月日
北京师范大学珠海分校学位论文写作声明和使用授权说明
学位论文写作声明
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论文作者签名: 日期: 年月日
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论文作者签名: 导师签名:
日期: 年月日
急性髓系白血病PML/RARA
融合基因芯片检测方法的研究
摘要
目的本论文建立荧光实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法并检测初诊急性早幼粒细胞白血病(APL)患者甲幼粒细胞白血病/维甲酸受体(PML/RARA)融合基因含量,评价检测结果的临床意义。方法采用“欧洲抗癌计划”推荐的引物和探针建立RT-PCR方法,检测51例初诊APL患者的PML/RARA融合基因含量,并分析其临床意义。
探讨双色双融合荧光原位杂交技术(RT-PCR)在成人急性白血病(AcuteLeukemia,AL)中的应用价值。方法应用RT-PCR检测我院26例AL患者相应的AML1/ETO、MLL、PML/RARA融合基因,并与常规R-显带技术进行比较。RT-PCR技术是检测成人急性白血病PML/RARA、MLL、AML1/ETO基因重排的可靠方法,适用于AL的诊断、疗效判定及微小残留病灶的检测。
急性早幼粒白血病(APL) 的标志性基因,、实时定量RT-PCR等
结论 RT-PCR方法敏感、可靠,可以对APL初诊患者进行诊断和分型。巢式RT-PCR对APL的诊断有高灵敏度和高特异性; 对APL的疗效及预后判断有重要临床意义。
关键词:急性早幼粒细胞白血病;巢式RT-PCR;PML/RAR􀀁融合基因;
Detection of Acute Myeloid Leukemia PML / RARA by Gene Chip Method
ABSTRACT
XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXx
Keywords:
目录
第1章、文献综述和研究背景 6
第2章、材料与方法 10
第3章、结果及分析 23
第4章讨论 24
第1章、文献综述和研究背景
引言
95%以上的急性早幼粒细胞白血病( acute promyelocytic leukem ia, APL)患者具有特异性染色体易位, 形成PML /RARA融合基因转录本。本研究主要针对上述最特异、常见的恶性克隆基因片段, 采用巢式RT-PCR 检测APL 患者靶融合基因转录本mRNA 的表达及动态变化, 探讨其在APL患者诊断、疗效及预后评估中的临床意义。为了研究PML/RARA融合基因检测芯片在白血病诊断、分型、治疗方案选择及预后判断中的应用价值,设计了融合基因检测探针,制成寡核苷酸芯片;采用逆转录方法、荧光标记白血病细胞cDNA 并进行杂交,以检测白血病细胞中PML/RARA基因。
急性髓系白血病PML/RARA基因的研究背景
急性早幼粒细胞白血病(APL)约占所有急性髓系白血病(AML)患者的10%~15%。
该型白血病易并发弥漫性血管内凝血,预后较为凶险。90%以上的APL患者有t(15;17)(q22;q12-21),该易位使15号染色体上的早幼粒细胞白血病(PML)基因与17号染色体上的维甲酸受体(RARA)基因融合,形成甲幼粒细胞白血病/维甲酸受体(PML/RARA)融合基因,编码PML/RARA融合蛋白,该蛋白具有不同于正常RARA等位基因编码的野生型RARA的功能,阻断了粒细胞的分化成熟,导致APL的发生。既往检测PML/RARA融合基因的逆转录聚合酶链反应(R