文档介绍：一、普通分光光度法
通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。
⑴若各组分的吸收曲线互不重叠,则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。
⑵若各组分的吸收曲线互有重叠,则可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。
Aλ1= εaλ1bca + εbλ1bcb
Aλ2= εaλ2bca + εbλ2bcb
二、示差分光光度法(示差法)
普通分光光度法一般只适于测定微量组分,当待测组分含量较高时,将产生较大的误差。需采用示差法。即提高入射光强度,并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。
设:待测溶液浓度为cx,标准溶液浓度为cs(cs < cx)。则:
Ax= εb cx
As = εb cs
ΔA=Ax -As =εb(cx - cs )=εbΔc
测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔA。
ΔA=Ax -As =εb(cx - cs )=εbΔc
测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔA 。
示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值,则待测溶液浓度cx :
cx = cs + Δc
示差法标尺扩展原理:
普通法: cs的T=10%;cx的T=5%.示差法: cs 做参比,调T=100%则: cx的T=50% ;标尺扩展10倍
三、双波长分光光度法
不需空白溶液作参比;但需要两个单色器获得两束单色光(λ1和λ2);以参比波长λ1处的吸光度Aλ1作为参比,来消除干扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。
ΔA =Aλ2 -Aλ1 = (ελ2 -ελ1)b c
两波长处测得的吸光度差值ΔA与待测组分浓度成正比。ελ1和ελ2分别表示待测组分在λ1和λ2处的摩尔吸光系数。
关键问题:
测量波长λ2和参比波长λ1的选择与组合
以两组分x和y的双波长法测定为例:
设:x为待测组分,y为干扰组分,二者的吸光度差分别为:
ΔAx和ΔAy,则该体系的总吸光度差ΔAx+y为:
ΔAx+y = ΔA x + ΔA y
如何选择波长λ1 、λ2有一定的要求。
选择波长组合λ1 、λ2的基本要求是:
⑴选定的波长λ1和λ2处干扰组分应具有相同吸光度,即: ΔAy = ΔA yλ2 - ΔA yλ1 = 0
故: ΔAx+y = ΔA