文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
体外培养人口腔粘膜上皮异常增生细胞系及特性检测
姓名:黄吉燕
申请学位级别:硕士
专业:口腔内科(粘膜病)
指导教师:周曾同

缩略语表简称英文全称中文全称土鏖鱼些塑堕鉴远型————————————————————————————————————————————————————————————一培养液单链构象多态性分析角化细胞培养液口腔粘膜异常增生上皮细胞聚合酶链反应胎牛血清上皮生长因子角蛋白流式细胞仪’痵
体外培养人口腔粘膜上皮异常增生细胞及特性检测中文摘要型,为进一步研究癌变机理,进行药物实验等具有重要的意义。目前关于口腔粘膜上皮异常增生细胞体外培养研究的报道鲜见。目的:采用体外细胞培养方法,研究口腔粘膜异常增生细胞的培实验依据。同时培养口腔粘膜上皮异常增生细胞,探索优化的细胞培养体系,并建立口腔粘膜上皮异常增生细胞系。么车奶逋馀嘌椒ㄅ嘌丝谇徽衬ふI掀は赴捎孟嗖钕晕⒕倒鄄煜赴纳ぬ匦裕干涞缇倒鄄煜赴超微结构,同时采用角蛋白免疫组化的方法做细胞的上皮源性检测;检测细胞的异倍体率。显子槐浞治觯冉先橄赴耐槐渎省结果:捎梦扪G褰腔赴嘌海⒃谙赴ù∈笔用低浓度血清,能建立起口腔粘膜异常增生细胞的稳定培养体系。化细胞,光镜下其形态与生长方式与正常上皮角化细胞相似,角蛋白染色呈阳性。透射电镜下发现正常上皮细胞间有丰富的桥粒互相连接,在口腔粘膜疾病中,癌前病变占有较大的比例。癌前病变是一个由正常组织演变成癌组织的过程,在此阶段如果能够阻断癌变的进程,就可能预防恶性肿瘤的发生,这一直是国内外研究的热点。癌前病变的病理学表现常常是组织的异常增生,因此构建体外异常增生细胞模养体系,生物学特性,为寻求建立体外粘膜癌前病变的细胞模型提供方法:捎梦扪G褰腔赴嘌阂约昂G宓南赴嘌赴魑2握兆椤用克隆形成率,生长曲线法测定细胞的体外生存能力;⑾諨细胞是一种依赖性生长的生存期限为碌姆怯郎
并且有大量的角化珠和角质存在;赴淝帕O始薪侵皮相似,第三,四代较正常上皮细胞高;赴旧逡毂短迓蚀体外培养癌前病变及角化现象出现,癌细胞中桥粒及角质缺如。正常角化上皮细胞体外倍增时间为小时,赴对鍪奔湮∈弊笥遥琢鱿赴体外倍增时间为小时。赴目寺⌒纬陕试诘诙胝I.%,介于肿瘤细胞和正常细胞之间。中虻牡ヒ晃坏慵岸辔坏愕耐槐渎室4笥谡细胞,.%,三株肿瘤细胞系均存在因的多位点突变。说明在癌变的发展过程中,存在着介于正常与肿瘤之间的过渡型细胞。赴奶厥馍镅形NQ芯可掀ひ斐T錾锥蔚陌┍浠理及其阻抑癌变提供了理想的细胞模型。上皮细胞异常增生细胞关键词:甋
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等新技术的发展,对既往病人的组织切片回顾性研究已成为可能,然单纯,易于筛选作用因子等优点,因而成为重要的探索目标。英国学者等在年用含血清的培养液和赴旌吓嘌姆椒ǎ传代啻<诎装呤且桓隽俅灿氩±砘旌系母拍睿虼巳非械判定白斑细胞是很困难的。所以具有话装咧饕2±硖卣鞯囊斐7但是关于口腔异常增生细胞的培养及特性的研究极少,到目前癌前病变是一个由正常组织演变成癌组织的过程,此阶段的细胞生物学行为常处于不稳定状态,因而比肿瘤细胞更易接受向良性转变的分化诱导,这使得深入研究癌前病变具有特殊的意义和广泛的应用前景。在徽衬ぜ膊≈校┣安”湔加薪洗蟮谋壤┣安”渥橹的病理学检查常发现上皮细胞的异常增生现象,包括细胞群体和个体的变化,例如:上皮钉突的滴露状改变,细胞失极化,异形化,错角化等。因此研究异常增生上皮细胞的生物学行为,癌变机理,以及阻断、逆转细胞恶变进程的方法,不仅对防治口腔粘膜癌前病变有意义,而且对于解剖结构类似,但部位隐蔽的胃、食道、气管、宫颈等粘膜上皮来源的肿瘤的防治有重要的学术价值。口腔白斑是最典型的口腔癌前病变之一,由于免疫组化,原位杂交而在动态观察口腔白斑的发展过程中,建立动态的癌前病变模型仍然必不可少。,.二甲苯丙葸盏冀鸬厥蠹漳艺衬ぐ装呤迄今最经典的模型。建立人类口腔白斑细胞株是白斑实验研究中的一个大胆的设想。因为与以往的实验动物作为材料来研究口腔白斑相比,细胞株更具有直接性和说服力。同时以细胞株作为实验研究,具有条件易控,外环境成功建立了一株人口腔粘膜异常增生上皮角化细胞株殉晒育的上皮细胞株可以被认为是研究口腔白斑的合适对象。谔教烟草,病毒,槟榔等致癌因素的作用机制以及其他与白斑有关的实验研究方面可以发挥作用。日
———————————————————————————————————————————————————————————————一性,例如:研究对象是活细胞,研究条件可人为控制,研究样本单一,斑癌变机理,以