文档介绍：第四节经典液相色谱法
液相色谱法:以液体为流动相的色谱法称~。
经典液相色谱:固定相颗粒较大且不均匀
常压下输送流动相
柱效较低
分析周期长
现代液相色谱:固定相颗粒小且均匀
高压下输送流动相
柱效较高
分析周期短
一、液-固吸附色谱
(一)分离原理
(二)常用吸附剂
(三)吸附剂和流动相的选择
(一)分离原理各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心利用吸附剂表面的活性吸附中心对不同组分的吸附能力差异而实现分离
(二)常用吸附剂:多孔、微粒状物质
1. 硅胶
2. 氧化铝
3. 聚酰胺
1. 硅胶(SiO2·H2O)
结构:内部——硅氧交联结构→多孔结构
表面——有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心
特性:
1)与极性物质或不饱和化合物形成氢键
物质极性↑,吸附能力↑→强极性吸附中心,不易洗脱
吸附活性次序:活泼型>束缚型>游离型
2)吸水→失活
→105~110OC烘干30分钟(可逆失水)→吸附力最大
→500OC烘干(不可逆失水)→活性丧失,无吸附力
适用:分析酸性或中性物质
续前
2. 氧化铝
碱性氧化铝 pH 9~10 适于分析碱性、中性物质
中性氧化铝 pH> 适于分析酸性碱性和中性物质
酸性氧化铝 pH 4~5 适于分析酸性、中性物质
3. 聚酰胺
氢键作用
氢键能力↑强,组分越后出柱
(三)吸附剂和流动相的选择: 依据被测组分、吸附剂和流动相的性质
1. 被测组分性质(极性大小):
烃< - - - - - - - - <羧酸,醇
2. 吸附剂的活性:
吸附剂的活性↑大,对被测组分的吸附能力↑强
强极性物质——选择弱吸附剂
弱极性物质——选择强吸附剂
3. 流动相的极性:
流动相极性↑大,对被测组分的洗脱能力↑大
“相似相溶”原则:根据组分性质、吸附剂的活性,
选择适当极性的流动相
续前
4. 三者关系图示:
组分吸附剂流动相
极性活性小极性
非(弱)极性活性大非极性或弱极性
二、薄层色谱法
(一)概述
(二)定性参数
(三)吸附剂的选择
(四)展开剂的选择
(五)薄层板的制备
(六)定性与定量分析
(一)概述
:将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上,
形成薄层而进行色谱分离和分析的方法
:见图示
铺板→活化→点样→展开→定位(定性)/洗脱(定量)
:吸附(分配,离子交换,空间排阻)
:分析快速、灵敏、显色方便
:药物杂质检查、纯度测定 next
图示