文档介绍:上海第二医科大学
硕士学位论文
诱导人骨髓间质干细胞成骨能力的实验研究
姓名:李静
申请学位级别:硕士
专业:口腔临床医学,口腔修复学
指导教师:张保卫
嶂こ淌墙以利于细胞粘附、生长、增殖和分化,并形成功能性组冬夕石/于异体松质骨基质诱导人骨髓间质干细胞成骨能力的实验研究中文摘要/材料和方法:了崭新的思路与方法是骨髓中具备较强的体外诱导培养方法,同时证明经过诱导哂幸欢ǖ某晒悄芰欣谕贫骨组织工程的发展和为早日进入临床应用提供参数和理论依据。理想的组织工程支架材料应具有生物相容性、生物可降解性、多孔性等特点,具有良好的骨诱导作用和组织相容性,并且具有多孔网状结构,因此本实验选用的人骨髓间充质干细胞作为种子细胞,,并研究其在裸鼠体内的成骨活性及组织工程化骨的形成情况,为组织工程进一步应用于临床提供理论依据和应用参数。。:早期诱导组和延迟诱导组,分别研究其形态学变化、超微结构变化、徒涸谋泶铩⒓钚粤姿崦溉旧ê凸歉频鞍椎牟舛ǎ研究细胞生物学特性及其体外成骨能力。,回植于裸鼠皮下。分别在苋〔模写筇骞察和组织学检测评价,对其体内成骨能力进行研究。早期诱导组,细胞贴壁呈菱形,天融合,成纤维细胞集落样生长。各代结果:上海第二医科大学级硕士研究生毕业论文
旧粜裕谌拇锏阶钋俊9歉扑馗鞔觳獾健M干涞缇倒鄄旄鞔胞超微结构变化提示第三四代的细胞已具有一定的成骨能力;细胞与脱细胞一脱钙骨松质亲和力好,形成的复合物在裸鼠体内在第苡行鹿切纬伞延迟诱导组,细胞贴壁呈梭形,天融合,第四代停止增殖。原代、第一代细胞中骨钙素未型胶原免疫组织化学法各代均有表达,但不均匀结论:呈指纹状生长方式。细胞生长至后有骨钙素分泌。应用成骨细胞条件培养液在体外能够促进人虺晒窍赴只诖锏扩增为足够数量的同时保持良好的生物学特性~.一定的成骨能力,验证了是一种比较理想的骨组织工程种子细胞。早期诱导的方法是较为完善的体外诱导培养条件和方法,能够使诮隙淌奔浯罅坷┰霾⑾虺晒窍赴只泶镆欢的成骨活性。,是一种极具潜力的组织工程支架材料。,堋芫行律亲橹纬证实:
.餾簄琣,,甀,,琭琣‘..
,甅,.,,琾,.篒瓾,瓵“.猻甀瑃畉甌:
引言骨缺损是临床常见的疾病,目前常用的治疗方法主要采用自体骨移植、异体骨移植、人工合成替代品等修复骨缺损。这些方法各有优缺点,难以满足临床上修复各种骨缺损的需要。如何更好地修复骨组织缺损,成为关注的热点。近年来。组织工程学的提出和发展开拓了一个新的研究及应用领域【。在骨组织工程学的研究中,选择适宜的骨种子细胞是骨形成的基本要素。理想的种子细胞应具有以下几个特点:来源丰富,取材容易,对机体的损伤小;在体外培养中有较强的传代繁殖力;植入机体后能适应受区生理、病理、应力等环境并保持成骨活性。目前在骨组织工程研究中其种子细胞主要有以下几个来源:骨:在骨种子细胞中最早使用的是胚胎骨或新生骨,人们希望通过骨来源能够找到成骨细胞的前体细胞。,造成了新的创伤,而且获取细胞的数量极为有限,因此其应用受到很大限制。骨膜:软骨和骨形成的间充质前体细胞群,主要存在于内层。然而骨膜的来源有限,取材不易,。⒐撬瑁汗撬璩晒悄芰χ饕@丛从贐,它是~种具多向分化潜能的细胞,可向成骨系细胞、软骨细胞、成纤维系细胞、脂肪细胞和网状细胞等多方向分化】。捎诶丛闯渥悖曰宕瓷诵。叱晒乔能,因此,是目前公认的较为理想的骨种子细胞来源,具有良好的临床应用前景。⒐峭庾橹焊髦稚掀ぁ⒐恰⑼迅乒腔驶駼等植入骨外组织,有新骨形成,提示骨外组织中可能也存在骨祖细胞。研究表明广泛存在于毛细血管、微血管、神经组织、视网膜和肌肉、肺中的周皮细胞均具有异位诱导成骨潜能诠峭庾橹醒罢倚碌墓侵肿酉赴嵌云渌丛吹南赴牟钩洌湔嬲某骨性能和机制尚不完全清楚,其在骨组织工程研究和应用中的真正价值,目前仍在探索之中。本实验采用人骨髓问质干细胞,经体外分离、培养和诱导分化,观察其体外成骨能力,通过组织工程技术和方法,评价其体内成骨能力,为以人骨髓间质干细胞作为骨组织工程种子