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产品无菌检验操作规程
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公司
×××××××××公司
文件编号
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产品无菌检验
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作业指导书
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1 目的
通过无菌检验,确保灭菌后产品能够达到无菌的要求。
2 适用范围
适用于灭菌后医疗器械产品(列举)的无菌检验。
3 检验依据
本厂产品注册标准(编号)
EN1174-1996 医疗器械灭菌产品中微生物数量的评估
《中国药典》(2005年版)
-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分:生物试验方法
GB15980-1995 一次性使用医疗用品卫生标准
4 仪器、设备
百级层流超净工作台、电热干燥箱、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、压力蒸汽灭菌器、集菌仪(器)、电子天平、PH计、冰箱、恒温水浴锅、酒精灯、三角烧瓶,接种环、无菌棉签、镊子,试管架,大试管若干等。
5 无菌检验室的环境要求
无菌检验应在环境洁净度10000级下的局部百级的单向流空气区域内进行。
缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压,阳性对照室与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于10Pa。无菌检验室的室温应保持18~26℃,相对湿度:45~65%。
无菌检验室的单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的监测。每年至少检测一次。
无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落数:每次操作时在层流空气所及台面的左中右置3个营养琼脂平板,暴露30min,于30~35℃培养48小时,菌落数平均应不超过1CFU/平板。
6 无菌检验前的准备
器具灭菌、消毒
灭菌:试验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方法灭菌。可经电热干燥箱160℃以上干烤2小时,或置压力蒸汽灭菌器内121℃蒸汽灭菌30分钟后使用(根据灭菌效果验证决定灭菌参数)。所有的灭菌物品不应超过2周即用毕,否则应重新灭菌。
消毒:凡检验中使用的器材无法灭菌处理的,使用前必须经消毒处理。如无菌检验室的试管架、电子天平、工作台面、工作人员的手、橡胶吸头等。可采用消毒剂浸泡或擦拭。消毒剂应每月更换,以防止产生耐药菌株。
标识:器具的灭菌、消毒后必须做好标识,标明灭菌、消毒时间和使用有效期。
人员、物料进入无菌检验室
开启紫外线灯或臭氧发生器进行空间灭菌处理,消毒时间不得少于30min。
物料进入无菌检验室流程
脱包:进入无菌检验室的物品若有双重包装的,需将外包装在传递窗/缓冲间拆除后,传入试验室。
消毒:进入无菌操作室的所有培养基、供试品等的外表都应采用适用的方法进行消毒处理,以避免将外包装污染的微生物带入无菌检验室。
传递:查看所有进入无菌检验室的器具上的灭菌、消毒标识,是否在有效期内。符合要求的经传递窗传入无菌检验室。
人员进入无菌检验室流程
更鞋***:在一更区脱去一般区工作鞋,穿上无菌检验室工作鞋;脱去一般区工作服。
洗手:首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫,再用流水连续冲洗20秒,洗净泡沫。
更衣:在二更区按照从上到下的顺序穿戴无菌工作服(包括衣、帽、口罩等),要求裤子掖在上衣里,口罩掩住口鼻,帽子包裹所有头发。
手消毒:用消毒液浸泡双手5秒以上或用浸过消毒液的棉球擦拭双手。消毒液可用洗必泰、新洁尔灭、碘伏、75%酒精等。
人员进入:经缓冲间进入无菌检验室。
人员进入无菌检验室后,进一步用消毒液擦拭工作台面,戴无菌手套。
7 无菌检验操作要求
全过程必须严格执行无菌操作,防止微生物污染。
使用玻璃器皿应轻取轻放,避免破损,以防培养物扩散。
所有操作均应在近火焰区进行,且不得有大幅度或快速动作,以免搅动空气中的尘埃微粒。
使用金属接种器具时,用前、用后均需灼烧灭菌。
在接种培养物时,动作应轻、准,防止培养物溅出,产生汽溶胶,造成污染。
操作过程中所有的带菌物品,用后均应作消毒、灭菌处理。可在检验过程中随用随时放入消毒液缸内浸泡或消毒桶内,或在检验完成后经传递窗传至一般区,立即用压力蒸汽灭菌锅121℃灭菌30分钟。
8 培养基制备
、厌气菌培养基(硫乙醇酸盐流体培养基)的制备
所用试剂
酪胨(胰酶水解)