文档介绍：衰老对小鼠脾CD4+CD25+T细胞的影响
【关键词】 CD4+CD25+T细胞;年龄;Foxp3;GITR
天然CD4+CD25+调节性T细胞在免疫反应中起抑制作用,维持机体对自身和外来抗原的免疫耐受〔1,2〕,其发育和功能受Foxp3控制〔3,4〕,其抑制功能与细胞表面表达GITR等分子有关〔5〕。近几年,这群细胞在自身免疫性疾病中的作用已经引起广泛关注。自身免疫性疾病常见于中老年人,随着年龄的增加,天然CD4+CD25+调节性T细胞发生了哪些变化尚不完全清楚。本文通过研究衰老小鼠CD4+CD25+T细胞的变化,探讨年龄对机体免疫功能的影响。
1 材料与方法
实验动物选取3个月(青年组)和20个月(老年组)的SPF级Balb/C雌性小鼠,购自北京维通利华公司。
试剂与仪器荧光标记的抗小鼠CD4、CD25、GITR单克隆抗体及同型对照抗体(BD),荧光标记的抗小鼠Foxp3单克隆抗体(eBioscience),丝裂霉素C(MMC,Kyo值。
统计学分析结果用x±s表示,统计方法为t检验。
2 结果
脾CD4+CD25+T细胞的变化用CY5抗CD4抗体和FITC抗CD25抗体标记细胞,老年组脾CD4+CD25+T细胞的百分数(±)%明显高于青年组(±)%(P<)。
脾CD4+CD25+T细胞抑制功能的变化将两组的CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞进行交叉实验,两组的CD4+CD25+T细胞均可以抑制青年组CD4+CD25-T细胞增殖,且无明显差异;但是老年组CD4+CD25+T细胞对自身CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用明显降低(P<)。见图1。
图1 脾CD4+CD25+T细胞功能的比较
脾CD4+CD25+T细胞Foxp3和GITR表达的变化两组CD4+CD25+T细胞中Foxp3表达无明显变化,但老年组CD4+CD25+T细胞表面GITR低于青年组(P<)。见表1。表1 CD4+CD25+T细胞中Foxp3+T细胞和GITR+T细胞的百分数与老年组比较:1)P<
检测CD4+CD25+T细胞的功能变化时,在老年鼠CD4+CD25-T细胞增殖反应中,加入老年鼠CD4+CD25+T细胞后,抑制作用不明显,说明随增龄CD4+CD25+T细胞的抑制功能降低。同时发现老年鼠CD4+CD25+T细胞能够抑制年轻鼠CD4+CD25-T细胞的增殖反应,但对自身CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用明显降低,提示老年鼠CD4+CD25-T细胞对于其自身的CD4+CD25+T细胞不敏感。天然CD4+CD25+调节性T细胞的抑制功能是接触依赖性的,GITR表达于细胞表面,与其抑制功能有关〔8〕。老年鼠CD4+CD25+T细胞表面GITR低于年轻鼠,可能与其抑制功能降低有关。已有研究显示,老年鼠CD4+CD25-T细胞反应性低于年轻鼠〔9〕。
虽然老年鼠脾CD4+CD25+T细胞百分数明显增加,但其抑制能力明显降低,并且自身CD4+CD25-T细胞对于自身CD4+CD25+T细胞不敏感。CD4+CD25+T细胞在维持体内的免疫耐受中起关键作用,随着年龄的增加CD