文档介绍：《植物学(一)实验》
电子教案
青海师范大学生命与地理科学学院
植物教研室
实验一、显微镜的构造和使用方法、植物细胞的装片技术与观察、测量尺的使用
一、实验目的
通过实验掌握显微镜的使用,识别植物细胞的结构,了解植物细胞的后含物和植物细胞的有丝分裂过程,学会临时装片的制作。
二、实验材料
常用光学显微镜、测微尺、植物学实验所用的解剖器具,植物细胞的永久装片、,洋葱,实验试剂(碘液)。
三、实验内容
1、显微镜的构造和使用。
显微镜的构造显微镜的种类不尽相同,有的简单,有的复杂,而且各有专门用途。本实验课所用的是最常见的复式显微镜(见图1)。它们的基本结构相同,都是由光学部分和机械部分组成。
光学部分:物镜、目镜、镜筒、聚光器和反光镜。
机械部分:转换器、粗准焦螺旋、细准焦螺旋、镜臂、载物台(镜台,上面装有压片夹或移动标本制片的推进器)、镜柱、倾斜关节、镜座。
显微镜成像原理显微镜能够成像主要是依据凹透镜成像原理,物像的扩大主要是物镜和目镜的作用。首先,利用反光镜将可见光反射到聚光器中,把光线汇聚成束,穿过生物制片(样品)射向物镜的透镜上,经透镜折射而在物镜与目镜之间形成生物制品结构的放大倒实像。这一倒的实像经过目镜的放大而形成倒的放大虚像。这个倒的放大虚像映入眼球内,在视网膜上形成正的像。由于人们的视觉****惯而产生倒像感觉。换句话说,用显微镜观察样品,我们所看到的是样品结构放大的倒像(见图2)。从以上成像过程可知,显微镜的放大倍数由目镜、物镜和镜筒的长度决定。镜筒长度一般为160mm,显然放大倍数主要由物镜和目镜来决定。通常显微镜、物镜与目镜上都刻有放大倍数,一般目镜越短,放大倍数越高,物镜越长,放大倍数越大。理论上显微镜具有的物、目镜放大倍数及它们之间的组合乘积为的放大倍数。理论上显微镜的最大倍数可以达到2 500倍,但是目前由于可见光波长和制造工艺的限制,虽能放大到2 500倍,但分辨率无保证,因此最好的显微镜最高的有效放大倍数只能达到1 000倍左右。有时说一架显微镜可以放大2 000倍,这只不过是
“能够”放大到这个倍数,并不标志此时的像是清晰的,也许只看见一个放大的模糊影像。
显微镜的使用
(1)取用、放回等搬动显微镜时,必须一手握持镜臂,一手托住镜座,使镜身直立,不可用一只手倾斜提携,以免摔落目镜、反射镜以及镜座。
(2)要轻拿轻放。将显微镜置于实验台上时,镜臂朝向自己,略偏向左方距实验桌的边缘约30mm处,右侧可放记录本或绘图纸等。
(3)使用显微镜前,首先要调节好光线,在实验室可以利用灯光或自然光,但不能用直射的阳光,以免损伤眼睛。首先转动转换器,使目镜、低倍物镜(通常是10×物镜)和通光孔成一直线,然后转动粗准焦螺旋,使物镜与载物台相距7~8mm,接着先把聚光器提上,打开可变光栏,在用左眼观察目镜中视野的同时,转动反光镜,使视野的光线最明亮、最均匀。如果靠近光源或光源较强,可用平面的反光镜;如果光源距离较远或光源较弱,可用凹面的反光镜。
(4)把要观察的切片置于载物台上,用推进器或手移动载玻片,使标本正对通光孔的中央(若无推进器的,移动后应用压片夹固定)。接着用左眼观察,若没看见标本,可慢慢旋转粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升,直到能看清标本为止。此时若物像不在视野中央,可移动载玻片,使标本物像出现在视野中央。移动时就记住显微镜中形成的物像是放大的倒像,故改变图像在视野中的位置时,需要朝相反的方向移动,或叫“对着干”,即偏右了向右移动玻片。反之亦然。然后再用细准焦螺旋进行调节。(注意:细准焦螺旋是显微镜上机械部件中最易损坏的部件,要尽量保护。通常使用低倍物镜观察时,用粗准焦螺旋调焦就可以得到满意的效果,在此情况下,尽量不用或少用细准焦螺旋。使用高倍物镜如需要用细准焦螺旋调焦时,转动量也最好不要大于半圈。)
(5)进行观察时,一定要双眼睁开,做到左眼观察,右眼看绘图,同时要先从低倍镜下观察起。先了解制片上切片的情况,如需详细观察制片中某一部分的细微结构,则先在低倍下找到合适的位置,并移到中央,然后转动镜头转换器,用较高倍的物镜观察。如尚需要用更高倍的物镜进一步观察某一部分的结构,则可重复以上步骤。在观察过程中,由于材料、目镜、物镜放大倍数等不同,所需光线强弱也不同,则靠调节聚光器上、下位置和光栏光圈大小来实现。
(6)本实验通常使用高倍物镜,基本上能达到目的。如观察材料欲放大1000倍以上时,则需使用油浸物镜(即100×)。使用油镜时,采用的目镜跟使用其他倍数的物镜时一样,可用10×,15×,25×等。观察时必须先用高倍物镜找到要观察的部位,调至视野中央后,再转动粗准焦螺旋。提高镜筒,转动镜头转换器,使油镜头与镜筒相对,然后在所要观察材料的盖玻片上面,在