文档介绍：XXX人民医院检验科微生物室
标准操作文件
文件编号:WSW-SOP-007
版本号:2007 第1次修改
编写者:XXX XXX
审核者:XXX
修订日期:2012年1月15日
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血液及骨髓标本细菌学检验标准操作规程
规范血液及骨髓标本细菌学检验标准操作规程,确保检验结果准确可靠。
血液及骨髓。
标本类型血液及骨髓。
标本采集
采血时间抗菌药物治疗前,发热初期或高峰时抽血。
采血频率对怀疑菌血症的成年病人,推荐同时在不同部位采集2~3套(每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厌氧瓶或者两套需氧瓶),对感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集;婴幼儿病人,推荐同时在不同部位采集2套,可不做厌氧培养。
采血量以培养基的1/10为宜,***一次采血5~10 ml,婴幼儿为1~2 m1。
骨髓标本用骨髓穿刺针从髂骨采集。
3 。
3 3 2 培养瓶标识与化验申请单不符。
3用过期的培养瓶采集标本、采血量不足等。
对于不合格标本,应及时通知采集人员重新留取标本。
标本保存采集标本后立即送到实验室,不能及时送检可置室温,切勿放冰箱。冬季血培养瓶在送检过程中应采取一定的保暖措施。
、仪器
革兰染液、氧化酶试剂、3%过氧化氢、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化试剂等。
BACT/Alert 3D或BACTEC 9000全自动血培养系统、VITEK鉴定系统。***需氧血培养瓶、厌氧血培养瓶、儿童血培养瓶、革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性菌药敏卡((GNS)、革兰阳性菌鉴定卡(GPI)、革兰阳性菌药敏卡(GPS)、真菌鉴定卡(YBC)、药敏纸片、ATB板条等。
接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、C02培养箱等。
试剂的有效期和使用参照试剂说明书。
参见《质量管理程序》。
接收标本后,立即对标本进行编号、登记。门诊病人要同时登记住址,联系电话等病人信息。
。当标本有菌生长时,仪器发出阳性报警,应立即用无菌注射器抽取瓶内培养液作直接涂片革兰染色,镜检,将结果向临床I墓师报告,同时转种血琼脂平板、麦康凯平板(或中国蓝平板)或加做巧克力平板,并进行直接药敏试验,置35℃、5%C02培养箱培养18~24小时。从琼脂平板上挑取菌落进行涂片染色及触酶和氧化酶试验。革兰阳性菌和革兰阴性菌分别选用GPI及GNI上机进行细菌鉴定和药敏试验或者做K—B法药敏试验(具体操作见《药物敏感性标准操作规程》)。
℃孵育箱,经18~20小时孵育在血琼脂平板或巧克力平板上盲目转种一次。
,培养瓶继续孵育至第5日,每日观察一次有无菌生长,并摇匀继续培养,下列几种情况提示有细菌生长(表5—28)。
表5—28培养瓶中有细菌生长时的不同反应
根据肉眼观察,对有细菌生长迹象,取菌悬液涂片作革兰染色,同时分离培养,接种需氧血琼脂平板、麦康凯平板(或中