文档介绍:万方数据
图像分析中光密度参数物理意义的正确理解和使用~甋甁李枫:—.本┐笱б窖Р孔橹в肱咛パЫ萄惺遥本在形态学实验结果中。表达反应强度或物质含量的测量参数有光密度、吸光度珹突珿等,由光密度又引申出平均光密度珹突止饷芏等参数。研究表明,当光线通过某一密度均匀的物质时,被吸收光线的多少与该化学物质的含量呈正比【唬蚪馐臀9吸收量等于物质的克分子量,而与物质对光吸收的多少与照射光强度无关一。查阅相关文献过程中,发现一些值得讨论的现象和问题,综述如下。饷芏炔问掷嗉捌湮锢硪庖光密度光密度,定义为光线通过介质前的人射光强度胪干光强度比值的对数值,表达式为/@砺垡丫证实舛鹊扔诠饷芏。当使用图像分析系统进行测定时,入射光强度和透射光强度分别称为入射光灰度值和穿过样品后的透射光灰度值耸蔽舛戎党莆9饷芏,或将细胞在同一光源下吸收透过光的数值作为值一。光密度的通俗解释是,一定的物质能吸收~定波长的光。在黑白图像中表现为灰度的改变,而黑白图像的来源是将彩色图像转化为黑自图像的形式,黑白图像的像素灰度设置范围是到通式薄M。就彩色图像的某一点来说,其镏含量扑愎郊喙匚南。平均光密度平均光密度。定义为整个视野中每一点的光密度的叠加除以点数的总和,即艫/琋代表点数的总和:测试以。定律为基础,其物理意义为一束单色平行光透过分布均匀的物质,光能被吸收,光的能量等于该物质的克分子量一,有部分文献使用了平均吸光度一代替泶相同意义。从瓿瞿勘昶骄饷芏群屯臣瞥∑骄饷度等参数一。积分光密度定义为测量标本结构范围内各个像素点光密度之和,表达式为,其中肀徊饷婊籌也町解释为所测结构范围内各像素光密度值之和。即芆/,5趇个像素的光密度值,表达为整个视野中每一点的光密度的叠加。煞从乘饨峁沟墓饷芏扔朊积的综合变化,,与物质的质量成正比,其数值反映物质的相对含量【弧光密度与物质含量的关系在同一照明度下。不同组织成分透过光线的数值,。透过的光线越少,光密度数值越大。因此,光密度值可以用于衡量组织或细胞中某种成分的含量一。以免疫组织化学反应结果为例,对于反应产物的定量四解剖学杂志年第卷第;..:.—珼.—。,..猄琒瓸—琒Ⅱ.:—.珼琌/。。—:—.琙猄.:.—
万方数据
透射光强度厶小于入射光强度,。,即腹饴识《牍紸疶计算获得相应光密度数值。理值范围为ⅨK孀磐腹饴识≈档慕档停琌或吸光化处理,实际是图像数据经过数学能量计算之后对抗体染色数量的定量。承┪侍獾奶致关于灰度和光密度的使用测最生物学标奉的反应强度,其数值大小可用灰度数值表示,图像明亮的部分灰度值大,图像暗淡的部分灰度值小,但因为在光学理论上灰度值是相对测量值,而光密度祷蛭度凳蔷灾担郧阆蛴谑褂霉饷芏戎底魑6坎饬渴据。灰度和光密度都用于形态学的量化,但两者有区别。灰度是通过显色剂在标本中对反应部位颜色着色的深浅程度判断某种物质在标本中的分布和含量。光密度是根据细胞内不同化学成分的染色反应具有不同的吸收波长,并且化学反应在吸收值和细胞化学含量问存在一定的化学剂蜒关系的特点发展起来的町见光吸收光度术【掖斯饷芏仁涤Ω?煽俊光密度参数使用中存在的问题主要问题如下:馐圆问谋泶锓椒ǎ测试数值的有效性;恼履谌萦胪急肀泶锏囊恢滦裕参数