文档介绍：菌种的保藏与管理
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菌种保藏的意义
菌种保存是为了减慢或停止菌种的生长繁殖﹔不被杂菌污染﹐在较长时期内保持著生活能力。以便为日常工作需求提供可靠的优质菌株。
微生物具有生命活力,在传代过程中容易发生变异甚至死亡,因此菌种保存是一项重要的基础工作,是微生物基础学工作的一项重要内容,也是药品微生物工作中的一项常用技术。
更有效的利用微生物资源。
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菌种保藏机构
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常用的菌种保藏方法
方法
主要原理
适用的微生物
保藏时间
特点
斜面琼脂低温保存
低温(4℃)
广泛
1--6个月
简便
液体石蜡保存
低温、缺氧
广泛
1年以上
简便
干燥(沙土)保存
干燥、无营养
产孢微生物
1--10年
简便但有效
冷冻真空干燥保存
干燥、低温、缺氧
广泛
5--10年以上
复杂但有效
液氮超低温保存
超低温
广泛
数十年
复杂但有效
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原理
、生化特性在人工创造的条件下尽量降低微生物细胞的代谢强度,使细胞处于基本休眠状态,生长繁殖受到抑制但又至于不死亡,以减低菌种的变异率。低温、干燥、缺乏营养等环境条件都有抑制微生物代谢的作用。
、干燥、真空是用于菌种保藏的重要手段。
,首先要考虑方法能否长期有效的保持菌种原有的特性,同时也应兼顾到方法的经济和简便。
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菌种保藏步骤
挑选特征典型的纯菌菌落。
确定保藏的合适菌体形态。
选择最适宜的方法保存。
定期对菌种进行检查,看是否有变化,保藏期满及时进行移种。
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琼脂斜面低温保存法
方法:将经常使用的菌种的典型菌落接种在斜面上,按规定的时间和温度培养,待充分生长后,把培养好的新鲜菌种用牛皮纸包好。为减缓培养基的水分蒸发,延长保藏时间,将管口塞上橡胶塞。放在4℃左右的冰箱中保存,每隔2--3个月移种一次,继续保存。
适用范围:细菌、酵母菌和霉菌保藏。
优点:简便、易于推广、对大多数微生物都适用。
缺点:保藏期太短、传代次数多、易发生变异和污染。
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注意事项
保藏的菌种应是新鲜培养物。
必须定期检查保藏菌种的冰箱的温度、湿度以及菌种管的橡胶塞是否松动,如有异常应及时处理。
每次移植后,应与原菌种的编号、名称逐一核对,确证无误后再保藏。
保藏细菌种用的培养基应无糖,其他菌类小于2%为宜,以免产酸过多,影响菌种生长。
铜绿假单胞菌在冰箱中易发生菌体自溶而死亡,不宜用本法保存。(可选择适宜的培养基置室温下保存)
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液体石蜡保存法
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