文档介绍：北京协和医学院八年制临床医学生药理学实验
药理学系
郭磊
腺苷酸环化酶活性测定
相关背景
实验原理
实验步骤
问题讨论
Background Review
cAMP是多种激素、神经递质等作用于细胞时的第二信使物质。由腺苷酸环化酶AC催化ATP分解而成。
ATP  cAMP + ppi
AC
Background Review
cAMP生成以后又在环磷酸腺苷酸二酯酶(PDE)的作用下分解失活。
这样AC和PDE共同维持体内的cAMP的动态平衡。
cAMP的浓度与细胞效应密切相关,因而调节AC以及PDE的活性即可以影响细胞的功能,其中AC活性的调节乃多种受体激活产生细胞效应的中心环节之一。
Background Review
中枢神经系统中存在多个多巴***效应系统,其中尾状核是多巴***受体分布较为丰富的区域,其作用与调节锥体外系的功能有关。
多巴***与细胞表面的受体结合,通过影响AC活性而发挥作用,很多抗精神病的药物是多巴***受点的拮抗剂,这些药物不仅能抑制多巴***与受体的结合,而且也抑制AC的活性。
Principle
本实验采用非标记底物法测定AC活性。即用非标记的ATP作底物,其被AC催化所形成的cAMP可以不经过分离通过蛋白竞争结合法直接进行含量测定,方法简便灵敏度高。
非标记底物测定cAMP浓度,间接推测AC活性的大小,同时观察多巴***和***哌啶酶对AC活性的影响。