文档介绍：免疫标记技术的临床应用进展
免疫技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法,即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂,以检测标本中的相应抗体或抗原。
特点:高度的特异性和敏感性
免疫标记技术
免疫标记技术的分类
总体分两类:免疫组化(组织切片)
免疫测定(液体)
一般按照示踪物及标记技术种类分为:
放射免疫技术
荧光免疫技术
酶免疫技术
化学发光免疫技术
放射免疫技术
放射免疫技术是利用放射性核素的可探测的灵敏性、精确性,抗原抗体反应的特异性组合而创建的一类免疫测定技术
医学生物学超微量分析的里程碑。
放射免疫技术分为: 放射免疫分析
免疫放射分析
放射免疫分析的测定原理
Ag + Ab Ag – Ab
+
Ag (待测品)
Ag – Ab
R
R
放射免疫技术的应用
放射免疫技术的特异性强、精密度好,灵敏度高(10-9-10-15 g/L),对半抗原和抗原的测定及仪器设备条件要求不高,是基层医院测定超微量物质的主要手段,常用于各种激素、微量白蛋白、肿瘤标记物和药物等微量物质的检测。
放射免疫技术的缺陷
放射性核素半衰期短,试剂有效期短, 通常为一个月。
由于标记物的不断变化,使试剂批间、批内差异大,标准曲线无法保存备用。
放射免疫使用放射性核素标记,需要一定的防护及废物处理措施。
结果测定依靠时间的累计,至少每一样本一分钟。
无法进行自动化分析
酶免疫技术
酶免疫技术将抗原抗体反应的特异性与酶促反应的专一性和敏感性结合而成的一种方法
酶免疫技术的分类
酶免疫组化
酶免疫均相酶免疫测定
技术酶免疫测定固相酶免疫测定
(EIA) 异相酶免疫测定
液相酶免疫测定
异相酶免疫测定
异相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类标记免疫测定技术。
基本原理是抗原抗体反应平衡后,需采用适当的方法分离游离的和与抗原(或抗体)结合形成的复合物的酶标记物,然后对经酶催化的底物显色程度进行测定,再推算出样品中待测抗原(或抗体)的含量。
酶联免疫吸附实验(ELISA)
可用于样品中抗体或抗原的检测,根据不同的检测目的、试剂来源和实验条件,可设计出多种类型的ELISA。
双抗体夹心法
间接法
竞争法
捕获法