文档介绍：大肠杆菌培养实验报告
篇一:大肠杆菌检测实验报告
国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数
实验目的
实验原理:国标法操作的原理
实验器材:
培养箱,10只移液管,1只250ml锥形瓶,5只大试管,试管架,4个平皿,500ml大烧杯1个,电子天平,纱布,脱脂棉,灭菌锅,PH计或PH试纸,100ml量筒,橡皮手套,超净台
实验药品:
磷酸盐缓冲液,蒸馏水,LB培养基,琼脂,5%NaOH,5%HCl
实验步骤:
一:
10只移液管,1只250ml锥形瓶,5只大试管,4个平皿,500ml大烧杯1个,100ml量筒进行洗涤,然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。灭完菌后烘干,完成后放入超净台中。
用酒精擦拭超净台,紫外消毒30min
二:
1:用电子天平称取成品LB 。 2:用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中,制成培养基。
3:用棉花堵住该锥形瓶的瓶口,用牛皮纸包住瓶口,用橡皮筋扎牢,再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。
4:灭完菌后放入超净台中备用。
三:
1:取1只无菌250ml锥形瓶,用量筒向其中加入49ml PBS
2:将1ml样品加入到该锥形瓶中,摇匀制成1:50的细菌溶液。
3:取4只试管,编号1—4
4:用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS
5:。 6:用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中,摇匀
7:用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取1ml细菌溶液,加入3中,摇匀......以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。
9:取4只平皿,编号1—4
10:分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取1ml的菌液置于4只平皿中,加入45—50摄氏度温度下的培养基,约15mm厚度。缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀;待培养基冷凝后倒置。
11:将培养基在36摄氏度条件下培养12小时。
12:取出培养皿,选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数。
四:实验结果(记得在操作过程和得到结果时拍照)
1号,2号菌落个数多不可计,舍弃
4号平皿中菌落数目小于10 cfu ,舍弃
3号平皿中菌落分布较均匀,数3号中的菌落数,一共有210个 cfu 。
计算样品中细菌浓度为: × 105 Cfu/ml
点评
超净台中的实验步骤讲述详细,明确,不错。前面的步骤叙述有点乱,建议按照如下标题重新调整顺序。
实验步骤:
1、仪器清洗
将烧杯,培养皿、试管等仪器用洗衣粉清洗,,超声5min,最后用三蒸水清洗,放入烘箱中烘干。
2、培养基配制
精确称量。。。。。。。。。。放入锥形瓶中,加入。。。。mL蒸馏水,摇匀
3,灭菌
包扎、灭菌,烘干备用
3、超净台中的操作(如上)
除了实验步骤和结果,还要有讨论和注意事项
例如:实验讨论:
1、评价该方法(操作简易程度,灵敏度如何,适用性)
2、为何选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数?
注意事项
比如各种仪器的使用注意事项,以及保持洁净,防止染菌等。
篇二:微生物生理生化实验报告
实验十一IMViC与硫化氢试验指导教师:李海花
周六第三组
学号:06012XX041 姓名:宋天佳专业:XX级水产养殖
学号:03021XX025姓名:皇昊专业:XX级化学1班
学号:06012XX055 姓名:续鹏辉专业:XX级水产养殖
一、实验目的
了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。
二、实验原理
IMViC是I-吲哚(indol test)、M-***红(methyl red test)、V-伏-普(Voges-Prolauer
test)和C-柠檬酸盐(citrate test)4个实验的缩写。这4个实验主要用来快速鉴别产气
杆菌与大肠杆菌,多用于水的细菌检查。大肠杆菌虽非致病菌,但在饮用水时若超过一
定指标,则表示水质受粪便污染。产气杆菌也广泛存在于自然界中,因此检查水是要将
两者分开。硫化氢(H2S)实验也是检查肠道细菌的生化实验。
(一)吲哚试验(indol test)
吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生,有些细菌分解培养基中的色氨酸生成吲哚(靛基质),经与试剂中的对二***氨基苯甲醛作用,生成玫瑰吲哚而呈红色。
色氨酸+H2O色氨酸酶吲哚+NH3+***酸
吲哚+ 对