文档介绍：枯草芽孢杆菌芽孢中的芽孢衣
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文章编号: 1000 —1336(2005)02-0108-03
《生命 ~ 2oo5 年 25 卷 2 期
,
CHEMISTRY OF LIFE 200525(2)
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枯草芽孢杆菌芽孢中的芽孢衣
刘燕秦玉昌
(中国农业科学学院饲料研究所,北京 100081)
摘要: 芽孢衣是赋予芽孢对有机溶剂和溶菌酶的抗性,以及对外界出芽诱导物的感应
能力的保护性结构。该文
主要介绍由枯草芽孢杆菌 (bacillus subtilis) 所形成的芽孢的芽孢衣中已鉴定的主要蛋白质,
及其基因表达调控和
应用等方面的研究进展。
关键词:芽孢衣:形态建成蛋白质 (ic protein) ;表面展示蛋白质
中图分类号: Q934
芽孢是某些革兰氏阳性细菌用于抵抗不良环
境的休眠结构。从开始形成到结束大约需要 8 ~10
h。在芽孢形成的初期,首先是经历不对称分裂
形成大小不等的两个细胞。大的为母细胞
(mother cel1) , 小的为前芽孢 (forespore) 。各自包
裹一部分染色体。然后前芽孢内陷进入母细胞,
形成大细胞中包裹小细胞的形式。大小细胞经历
不同的发育过程,前芽孢最终发育为芽孢,而母
细胞则为前芽孢的发育提供营养和结构成分。
收稿日期: 2004 一 l1— 30
作者简介:刘燕 (1982 一),女,硕士生, E— mail :******@yahoo
Com .Cn
芽孢的高度抗性主要依赖于高度脱水的核心
(core)及包裹芽孢的两层结构:皮层 (the cortex)
和芽孢衣 (the spore coat) 。在芽孢衣的组装过程中
基因表达的调控无疑是不可缺少的,但存储于蛋
白质本身或辅助蛋白质的结构信息对蛋白质的正
确定位也起到很重要的作用。已分离出几种指导
其他蛋白质正确定位的形态建成蛋白质:并提出
了芽孢衣的初步组装模型。芽孢衣蛋白质的自我
组装已经成为研究生物大分子自我组装的模型。
芽孢还被用作载体,利用其芽孢衣蛋白质来展示
其他外源蛋白质。
病毒载体,即新构建的 CRAd、作为阳性对照的
含巨细胞病毒启动子的腺病毒 (AdCMV—E1A)及
作为阴性对照的复制缺陷型腺病毒,以比较新构
建 CRAd的效力:还需设定检测时间及设定病毒
不同的感染复数 (multiplicity of infection , MOI),
以综合评价其复制水平和溶瘤能力:此外。还要
构建体内实验的动物模型。
临床前评价应包括体外和体内实验两部分。
正常及靶肿瘤细胞成活率分析: 而病毒复制能力
分析则可采用 Western 印迹法、空斑测定 (plaque
assay)及逆转录酶聚合酶链反应技术 fRT— PCR)
等。体内实验在构建动物模型后,瘤内注射一定
成活期;还需小鼠尾静
脉注射病毒,一定时间
后,取小鼠肝、脾等器官进行组织病理分析以评
价新构建 CRAd载体的毒性 m1。
近几年来, CRAd已成为有前途的新型癌症
基因治疗载体。尤其