尿中ALA测定实验报告.doc

文档介绍：08 检疫 HapyWu
尿中δ—氨基—γ—***戊酸(δ—ALA)的测定
实验目的
学会用乙酸乙酯萃取—对二氨基苯甲醛比色法测定尿中δ—氨基—γ—***戊酸(δ—ALA)的含量,从而了解铅吸收和铅中毒的诊断。
实验原理
℃的条件下,δ—ALA与乙酰乙酸乙酶缩合生成吡咯化合物。此化合物用乙酸乙酯提取,并与显示剂(对二甲氨基苯甲醛)作用生成红色化合物,根据颜色深浅进行比色定量。
实验步骤
标准曲线的绘制
取具赛比色管10ml6支,按下表配置标准色列:
试剂
0 1 2 3 4 5
ALA标准应用液(ml)

水(ml)

ALA含量(ug)
0 1 3 5 7 10
各管中加入2ml乙酸缓冲液,,混匀,于沸水中加热10分钟,取出冷至室温。
各管加入4ml 乙酸乙酯,加塞振摇1分钟,离心5分钟、取出静置分层。
各取乙酸乙酯提取液2ml于另外6支管中,各管加入2ml显色剂,加塞振摇,静置10分钟。
用分光光度计(波长554),以零管作参比,测其吸光度。根据ALA浓度与吸光度的关系绘制标准曲线。
尿样测定
,。
,各加入水1ml,乙酸缓冲液2ml,混匀。其一为样品管,另一为空白管。,,充分混匀,同时置沸水浴中加热10分钟,取出冷至室温。
~D进行,以乙酸乙酯作参比,进行比色定量。


管号
0
1
2
3
4
5
ALA含量(ug)
0
1
3
5
7
10
吸光度A
0





,。
。
,在正常范围内,故
尿中ALA(mg/L)=样品管中ALA含量(ug)
=
实验结论