文档介绍：食物中还原糖的测定方法:高锰酸钾滴定法和直接滴定法。
一、高锰酸钾滴定法
样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。
-85,本法适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。
(1) 滴定管
(2) 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚
(3) 真空泵
(4) 水浴锅
除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
6 mol/L盐酸:量取50ml盐酸加水稀释至100 ml。
***红指示剂:称取10mg***红,用100ml乙醇溶解。
5 mol/L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml。
碱性酒石酸铜甲液: 硫酸铜(CuSO4·5H2O),加适量水溶解,,再加水稀释至500ml,用精制石棉过滤。
碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500ml,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
精制石棉:取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2~3天,用水洗净,~3天,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时,用水洗净。再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。然后加水振摇,使成微细的浆状软县委,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充古氏坩埚用。
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1mol/L氢氧化钠溶液:称取4g 氢氧化钠,加水溶解并稀释至100ml。
硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷却后加水稀释至1L。
3mol/L盐酸:量取30ml盐酸,加水稀释至120ml。
5. 操作方法
样品处理:
乳类、乳制品及含蛋白质的食品:~2 g固体样品(吸取2~10 ml液体样品),置于250 ml容量瓶中,加50 ml水,摇匀。加入10 ml碱性酒石酸铜甲液及4 ml1mol/L氢氧化钠溶液,加水至刻度,混匀。静置30min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。(注:此步骤目的是沉淀蛋白)
酒精性饮料:吸取100 ml样品,置于蒸发皿中,用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,在水浴上蒸发至原体积1/4后(注:如果蒸发时间过长,应注意保持溶液pH为中性),移入250 ml容量瓶中。加50 ml水,混匀。"加10ml碱性酒石酸铜甲液"起依法操作。
含多量淀粉的食品:称取2~10 g样品,置于250 ml容量瓶中,加200 ml水,在45℃水浴中加热1 h,并时时振摇。(注意:此步骤是使还原糖溶于水中,切忌温度过高,因为淀粉在高温条件下可糊化、水解,影响检测结果。)冷却后加水至刻度,混匀,静置。吸取200 ml上清液于另一250 ml容量瓶中,"加10ml碱性酒石酸铜甲液"起依法操作。