文档介绍:泸州医学院
硕士学位论文
舒肝颗粒对大鼠肝星状细胞凋亡的影响
姓名:秦文燕
申请学位级别:硕士
专业:内科学
指导教师:李昌平
20070501
英汉缩略词对照表���英文缩写英文全称��中文全称酒精性肝病磷脂酰丝氨酸外翻分析细胞外基质��喙氐乃劳鼋峁�域纤维隔肝纤维化肝星状细胞肝硬化����金属蛋白酶抑制因子基质金属蛋白酶噻唑蓝肌成纤维样细胞�甋�碘化丙锭��交�〖《�鞍�������猇����������������產�����
学位论文作者签名:毒支参学位论文作者签名:签≤璺泸州医学院硕士研究生学位论文独创性声明泸州医学院学位论文版权使用授权书仅得的研究成果。学位论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含乓他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启签字日期:�阾或部分内容编入有关数据库进行检索,可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存学位论文,即:泸州医学院具有学位论文的数字化制品复制权,信息网络传播权和汇编权。保密的学签字日期:Ⅲ.�辍�拢�疎�本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及芡和所做的贡献均已在学位论文中作了明确的说明并表示了谢意。�本人完全了解泸州医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:泸州医学院有权保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权泸州医学院可以将学位论文的全部位论文在解密后适用本授权书。导师签名:
舒肝颗粒对大鼠肝星状细胞的凋亡作用摘要肝星状细胞���幕罨�鲋呈荋�纬傻闹行幕方冢�赴�饣����过括单方和复方的应用和研究,有的研究已深入到分子水平。剔毒护肝方、凋亡的作用���J娓慰帕V饕J钦攵跃凭�愿尾���尤其是酒精性肝纤大鼠肝星状细胞,观察其是否对大鼠肝星状细胞凋亡有影响,以探讨舒肝论依据。方法:��逋馀嘌�笫蟾涡亲聪赴����猅�。以���接种目的:肝纤维化��是各种原因引起的慢性肝损伤所共有的病理改变,量产生和沉积是形成�,最终导致肝硬化、肝功能衰竭的主要原因。因此,抑制��罨�鲋场⒋俳鳫�凋亡、抑制胶原合成分泌、促进胶原降解可抗肝纤维化。目前,抗肝纤维化尚无有效的治疗药物,西医抗肝纤维化治疗主要有抗氧化剂、细胞因子调节剂、血管活性物质调节剂、抑制信号通路等药物,这些药物或因毒性太大,或抗肝纤维化的作用不强,使临床应用受到限制。近年来,中医中药治疗肝纤维化显示出特有的优越性,包复方���臃肿铀�窖芯勘砻骶哂幸种铺逋馀嘌�腍�增殖和促进��维化的防治。通过细胞实验已证明舒肝颗粒能抑制肝星状细胞的增殖,抑制胶原蛋白的分泌,可减少胶原纤维在肝脏内的沉积。为了进一步探讨舒肝颗粒对肝纤维化的逆转是否有作用,我们采用舒肝颗粒作用于体外培养颗粒对肝纤维化的防治作用的机制,为舒肝颗粒的临床应用进一步提供理培养好的肝星状细胞在六孔板,培养�小时后,加入舒肝颗粒,分为三个浓度组:���/�,���/�,���/�。加药作用�小时后,取出镜下观察细胞形态的变化。然后吹打细胞,使其成为单细胞悬液,收集细胞悬液,
冷���竦匆≡龋�傻ハ赴��海坏髡�赴�ǘ萳��,缓冲液稀释��;取�吮��海���流式管中加入靴�����/��和�的碘化丙锭,混匀后室温避光孵育���辉诜从�苤屑尤���弃上清液,每根试管中加入�毗�銹�,振荡摇匀,成单细胞悬液;调整细胞浓度����撼逡合∈�:�蝗���悬液,于��魇焦苤屑尤�氧水消除内源性过氧化物酶的活性;采用��法,先滴加试剂�跤�正常对照组增����.����型砥诘蛲雎式仙佟T�.��痬�椋�涡亲���转/分离心,冷��逑春笤倮胄模�F�锨逡海�扛�怨苤屑尤����,流式细胞仪分析结果。�����接种肝星状细胞在六孔板,培养�小时后加药,浓度组同前,加药培养�小时后,镜下观察。吹打细胞,使其成为单细胞悬液,收集细胞液,��转/分离心,冷��逑春笤倮胄模����抗体,混匀后室温避光孵育���辉诜从�苤屑尤������流式细胞仪分析结果。通过流式细胞仪检测��,探讨舒肝颗粒诱导肝星状细胞凋亡的可能途径。��赴�嘌�笈榔��酝��囊┪锱ǘ茸饔��小时后,用�嬖だ�:��:鸵掖脊潭ǎ徽袅笏�逑础��浸泡、双�分钟,再滴加一抗�����跤�小时,��逑矗灰来蔚渭邮约罛、试剂��看畏跤��种樱琍�冲洗三次;再滴加��陨ḿ粒�逑础�晾干、封片;采用�����系统显微镜照相。��馗瓷鲜鍪笛楣�碳�测���。结果:���6哉兆榈牡蛲雎适�.��.�,不同浓度的舒肝颗粒���/�,���/�,���/�,对肝星状细胞的凋亡率分别是:�.�±��������.�,�.�±����髯榈牡蛲雎式险�6哉兆槊飨栽龈撸��别具有显著性��.��T�.��痬�椋�