文档介绍：蚓激酶注射剂的工艺中效价考察
郭燕青、贾飞飞
(北京百奥药业有限责任公司, 北京 102200)
关键词 蚓激酶 注射剂 效价
蚓激酶是从新鲜赤子爱胜蚓中提取、 纯化的蚯蚓纤溶酶, 具有预防、 治疗血栓病的功效。
蚓激酶溶栓组分为多种水溶性酸性蛋白质, 分子量约为 20.~ 40. KD 左右。 为了满足临床需
要,我们对蚓激酶注射剂进行立项研究。本文介绍了蚓激酶组分筛选工作中的效价测定。
1 材料
蚓激酶注射剂样品 (分子量为 30KD) ,北京百奥药业有限责任公司提供; 蚓激酶标准品、
牛血纤维蛋白原、 牛血凝血酶均系中国药品生物制品检定所产品; 琼脂糖 SIGMA 公司产品;
磷酸氢二钠、磷酸二氢钠为分析纯;游标卡尺。
2 方法和结果
 琼脂糖纤维蛋白平板法测定效价
1
具体测定方法参照国家药品监督管理局的国家药品标准【 WS- ( X-052 ) -2001Z 】。
 琼脂糖平盘的配制
1 支牛血纤维蛋白原, 77mg/支、 批号为 607-200131 ; 1 支凝血酶, 200BP/支、 批号为:
605-0123 ;称取琼脂糖  ;%生理盐水 204ml ;缓冲液 12 ml ;配制 3 小盘。
 对照品溶液的配制
蚓激酶标准品 , 批号为 650-200001 、3 万单位, 加 1ml 生理盐水溶解, 作为标准品溶液。
 供试液的配制
称 取 适 量 的 蚓 激 酶 注 射 剂 相 关 组 分 , 溶 解 在 处 方 溶 剂 中 , 使 蛋 白 含 量 为
 ,冻干后作为供试品,溶解在 2ml 生理盐水中作为供试液。
 测定
分别精确量取  、  、 、  、  的对照液各 10ul 滴盘做标准曲线,在同
一个盘上平行滴 10ul 供试品溶液, 37℃ 恒温箱中反应 18 个小时后取出 , 用游标卡尺量每个
溶圈的直径,计算效价。
 回收率的测定
用加样回收法。精密量取 1ml 供试品溶液作为回收试验空白溶液 ( 浓度为 1 万蚓激酶
单位 /ml), 分别精密量取蚓激酶标准品溶液 (( 浓度为 1 万蚓激酶单位 /ml)) 、  、 、
 、  ml 至 10ml 容量瓶中 , 用供试品溶液稀释 , 摇匀。按  方法测定,计算效价回收
率,结果见表 1。
1
表 1 回收率试验测定结果
加入量
蚓激酶单位
供试品含量
蚓激酶单位
测得量
蚓激酶单位
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
%
 万 1 万  万
 万 1 万  万
 万 1 万  万
 万 1 万  万
 万 1 万  万
 万 1 万  万
 线性范围
取蚓激酶标准品适量 , 加生理盐水配成 10000、8000、6000、4000 、2000 蚓激酶单位 /ml
的溶液,按  方法测定,以浓度( X