文档介绍：聚酰***的使用方法
刘丽敏
产品介绍
质量指标:分子量:14000~17000比表面:5~10m2/g
PH值: 6~7
产品价格:30~60目 180元/KG60~100目 240元/KG100目以上 300元/KG
溶解度:溶于浓盐酸,甲酸,微溶于醋酸,苯酚等溶剂,不溶于水,甲醇,乙醇,***,***,***仿和苯等常用有机溶剂,对碱较稳定,对酸的稳定性较差,尤其是无机酸,在温度高时更敏感。
吸附原理
聚酰***是由酰***键聚合形成的高分子化合物。其酰***基可与羟基酚类,酸类,醌类,硝基等化合物以氢键形成结合而被吸附,其脂肪长链可作为分配层析的载体。聚酰***在含水系统中层析时,聚酰***作为非极性固定相,其层析行为反向柱层析;在非水溶剂系统时,聚酰***作为分配层析的载体,其层析行为为正向柱层析。
应用范围
聚酰***特别适应于多元酚类化合物的分离,如黄***、醌类、酚酸、含羰基化合物、羧基化合物等。
例如:葛根素中提取葛根黄***、茶叶提取茶多酚、人参中提取人参皂苷、银杏叶中提取银杏黄***、甘草中提取甘草皂苷、甜叶菊中提取甜菊苷、发酵液中提取维生素和抗生素等成份
对鞣质吸附强,用于将植物粗提物中的鞣质除去。
前处理
新买的聚酰***
取聚酰***以90-95%乙醇浸泡,不断搅拌,除去气泡后装入柱中。用3-4倍体积的90-95%乙醇洗脱,洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣(或极少残渣)。再依次用2-%NaOH水溶液、1倍体积的蒸馏水、2-%醋酸水溶液洗脱,最后用蒸馏水洗脱至pH中性,备用。
前处理
用过的聚酰***
一般用5%NaOH水溶液洗脱,洗至NaOH水溶液颜色极淡为止。有时因某些鞣质与聚酰***又不可逆吸附,用NaOH水溶液很难洗脱,可用5%NaOH在柱中浸泡,每天将柱中的NaOH水溶液放出一次,并加入新的5%NaOH水溶液,这样浸泡一周后,鞣质可基本洗脱完。然后用蒸馏水洗脱至pH8-9,再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脱,最后蒸馏水洗脱至pH中性,重复使用。
聚酰***吸附法的操作
1、装柱:一般将颗粒状聚酰***混悬于水中,使其充分膨胀,然后装柱,让聚酰***自由沉降;当用非极性溶剂系统时候,则用组分中低级性的溶剂装柱。
2、稀释适当浓度上样:一般每100ml聚酰***-,样品先用洗脱溶剂溶解,浓度为20%-30%。水溶性化合物直接上样;若提取物水溶性不好,则用挥发性有机溶媒溶解、拌适量聚酰***、挥干或减压蒸干、干法装入柱顶。
3、水洗:先用水洗脱。
聚酰***吸附法的操作
4、醇洗:在水中递增乙醇浓度至浓乙醇溶液,或***仿、***仿-甲醇,递增甲醇至纯甲醇洗脱。若仍有物质未被洗脱,可用稀氨水或稀甲酰***溶液洗脱,分段收集。
5、找到最佳吸附比:先小量试验找到最佳吸附比。
6、放大:根据小试及最佳吸附比进行放大试验。
7、聚酰***的回收:使用过的聚酰***一般用5%氢氧化钠溶液洗涤,然后水洗,再用10%醋酸液洗,然后用蒸馏水洗至中性,即可。
黄***类化合物的分离
对于分离黄***类化合物来说,聚酰***是较理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄***类化合物分子中的羟基数目与位置。一般有以下规律:
1、苷元相同,连接糖越多,吸附力越大,流出越慢。 2、母核上增加羟基,洗脱速度相应减缓。 3、对位、间位酚羟基使吸附能力〉邻位酚羟基。 4、不同类型的黄***的流出顺序一般是:异黄***〉二氢黄***醇〉黄***〉黄***醇。 5、分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强,晚出柱。 6、若形成分子内氢键则吸附力减弱。
聚酰***柱层析的溶剂洗脱系统
含水系统洗脱能力:碱液>甲醇>水
溶剂洗脱能力与溶剂极性相关可使化合物得到较好的分离。
选择系统时,可以将样品加入上述溶剂系统中,观察样品在聚酰***薄膜的层析行为,然后确定溶剂系统。
含水溶剂系统
非水溶剂系统
甲醇-水(4:1)
乙醇-水(2:1)甲醇-乙酸-水(90:5:5 )
***仿-甲醇(94:6)
苯-甲醇(3:1/7:3)